今天與大家一起揭開黑膠蟲的神秘面紗。

江湖上流傳很久的黑膠蟲，到底真實身份是啥？

我們一起來扒一扒~

 

逍鵬生物收集了全國29個黑膠蟲污染樣本進行DNA提取、測序、數據庫比對，得到了鑒定結果，一起和大家分享一下吧。

 

表：黑膠蟲檢定

微生物種屬	樣本數	G+/G-	形狀	直徑大小
Mycoplasma  hyorhinis （豬鼻支原體）	3	/	/	0.15~0.3 μm
Mycoplasma bovis （牛支原體）	1	/	/	0.15~0.3 μm
Mycoplasma pulmonis （鼠肺支原體株）	1	/	/	0.15~0.3 μm
Mycoplasma yeatsii （山羊支原體）	6	/	/	0.15~0.3 μm
Actinobacterium sp. （放線菌屬）	1	G+	絲狀	寬度近于桿狀細菌，直徑0.5~1 μm
Ralstonia sp. （羅爾斯通菌屬）	1	G-	桿狀	1.2×2.5~3.5 μm
Brevundimonas sp. （短波單胞菌屬）	1	G-	桿狀	0.4~0.5×1-2 μm
Blastomonas natatoria （泳池芽殖單胞菌）	1	G-	卵圓形或桿狀	/
Pseudomonas sp. （假單胞菌）	1	G-	桿狀	(0.5～1)×(1.5～4) μm
Sphingobium sp. （鞘脂菌屬）	1	G-	桿狀	/
Sphingomonas sp. （鞘氨醇單胞菌）	5	G-	桿狀	0.3~0.8×1.0~2.7 μm
Methylobacillus sp. （甲基菌屬）	1	G-	桿狀	0.8~1.0×1.0~8.0 μm
Microbacterium sp. （微桿菌屬）	2	G+	桿狀	1~10×0.2~0.6 μm
Herbaspirillumhuttiense （赫氏草螺菌）	4	G-	螺旋型	長度至數十微米；螺旋波長為5~15 μm，螺旋幅度約一乃至數微米

 

如上表格所示：在這29個樣本中，有11個樣本鑒定為支原體，種類分別為豬鼻支原體、牛支原體、鼠肺支原體、山羊支原體。18個樣本鑒定為細菌，種類分別為放線菌屬、羅爾斯通菌屬、短波單胞菌屬、泳池芽殖單胞菌、假單胞菌、鞘氨醇單胞菌、甲基菌屬、微桿菌屬、赫氏草螺菌。

 

# 支原體污染 #

 

本次實驗中，有11個樣本鑒定為支原體污染。首先，我們先來了解一下支原體的基本特征。

逍鵬生物實驗室在做沉降菌檢測的時候，竟然出乎意外地培養出了一株支原體。支原體集落呈“荷包蛋樣”：圓形，核心部分較厚，向下長入培養基，周邊為一層薄的透明顆粒區。

圖1. 支原體菌落

 

圖2. 電鏡下的支原體

圖源網絡，僅供參考學習用

 

在電子顯微鏡下，支原體大小為0.15~0.3 μm，無細胞壁，不能維持固定的形態而呈現多形性，呈球形、球桿形、長絲狀及分支狀等。

 

豬鼻支原體  //

圖3. 固體培養基上的豬鼻支原體集落

圖源網絡，僅供參考學習用

 

鑒定結果：樣本1，6，15 為 Mycoplasma hyorhinis（豬鼻支原體）

大小：0.15~0.3 μm

感染宿主：其感染豬的上呼吸系統的上皮細胞，通過口鼻途徑傳播。小豬可以被母豬或它們的同伴（無癥狀攜帶者）感染

污染細胞途徑：推測胰蛋白酶主要是從豬的胰臟提取，純化獲得的結晶，再制成的凍干制劑，過濾除菌不當的胰酶溶液可能攜帶豬鼻支原體，建議大家買知名品牌胰酶，降低污染風險

 

 

鼠肺支原體  //

圖4. 固體培養基上的鼠肺支原體株

圖源網絡，僅供參考學習用

 

鑒定結果：樣本12 為 Mycoplasma pulmonis（鼠肺支原體）

大小：0.15~0.3 μm

感染宿主：大鼠和小鼠是主要的宿主。寄生于呼吸道上皮頂膜，附著感染從鼻前通道到肺泡的任何地方，可能是由表面糖蛋白介導的

污染細胞途徑：在提取鼠源的細胞，例如鼠巨噬細胞，鼠肺動脈上皮細胞，鼠原代海馬神經元時，如果提取的鼠帶有鼠肺支原體，就有可能會引入污染

 

牛支原體  //

圖5. 固體培養基上的牛支原體株

圖源網絡，僅供參考學習用

 

鑒定結果：樣本28 為 Mycoplasma bovis（牛支原體）

大小：0.15~0.3 μm

感染宿主：主要寄生于牛體內，感染部位廣泛，感染牛的呼吸道，會引起肺炎、中耳炎、關節炎、結膜炎

污染細胞途徑：推測細胞增殖的主要營養之一就是胎牛血清。胎牛血清來源于動物，其主要通過0.1μm濾膜過濾除菌。如果血源及過濾除菌不當，就會給細胞帶來潛在的支原體污染，因此建議大家購買知名品牌的胎牛血清

 

 

山羊支原體  //

圖6. 固體培養基上的山羊支原體株

圖源網絡，僅供參考學習用

 

鑒定結果：樣本9，10，17，18，19，20 為Mycoplasma yeatsii（山羊支原體）

大小：0.15~0.3 μm

感染宿主：主要寄生于山羊體內，感染部位廣泛，寄生于羊的外耳道，咽后淋巴結、肺、脾

污染細胞途徑：此類污染來源異常詭異，因為大家平時培養的細胞來源或營養體系，很難接觸到此類污染的環節，故很難推測到污染源頭。若培養相關的細胞或者使用相關的營養體系，就比較容易推測污染來源了

 

 

 

//  小結  //

如果黑膠蟲的真實身份是支原體，那么支原體本身不會游動，不符合黑膠蟲污染活躍游動或原地打轉、顫動的特征，故推測可能細胞本身存在潛在的支原體污染，剛好被檢測出來了。

 

好啦~

本期分析到這里也就結束啦~

剩余的18個被鑒定為細菌的黑膠蟲樣本我們將在下期分析，不要錯過哦！

如果您也想鑒定您的細胞是否有黑膠蟲污染

快來參加逍鵬生物的

“黑膠蟲通緝令”吧~

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