培養(yǎng)基的配制的基本步驟
瀏覽次數(shù):295 發(fā)布日期:2022-4-13
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1.未開封的干粉培養(yǎng)基保質(zhì)較長,已開封的保質(zhì)期會變短。在瓶體上注明開封日期,用后擰緊瓶蓋。個(gè)別品種易變質(zhì),如SC增菌液,可冷藏保存。
2.若干粉培養(yǎng)基結(jié)塊或顏色發(fā)生改變,不得使用。
3.配制用水可用蒸餾水、去離子水等,電阻率不小于30萬Ω•cm,每批應(yīng)檢查一次。
4.稱量干粉培養(yǎng)基時(shí)為避免污染,可用專用角匙。
5.自行配制的培養(yǎng)基,各營養(yǎng)成分應(yīng)按要求順序加入,避免產(chǎn)生沉淀。
6.盛放培養(yǎng)基的容器不宜用銅或鐵鍋,以防其離子混入培養(yǎng)基影響微生物生長。
7.稱量好的干粉培養(yǎng)基應(yīng)先溶解再高壓滅菌。
8.自行配制的培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解后再調(diào)PH。PH值須冷后測定,因培養(yǎng)基所含成分不同,對冷的和熱的進(jìn)行測定,其PH值相差很多。培養(yǎng)基的PH值須精確測定,否則會影響微生物的生長和反應(yīng)地觀察。另外,PH值不可反復(fù)調(diào)試,否則會影響培養(yǎng)基的滲透壓。
9.需要加熱煮沸的培養(yǎng)基應(yīng)避免溢出,應(yīng)邊攪拌邊加熱。燒糊的培養(yǎng)基,其成分已改變,不得使用,應(yīng)重配。
10.不須高壓滅菌的培養(yǎng)基,配制用水及盛放的容器可于配制前先進(jìn)行高壓滅菌。
11.配制好的培養(yǎng)基一般采用高壓滅菌,且應(yīng)立即滅菌,以防微生物生長消耗養(yǎng)分而改變培養(yǎng)基成分。
12.壓力蒸汽滅菌器應(yīng)定期檢定,平時(shí)可用生物指示菌法和化學(xué)變色紙片進(jìn)行滅菌驗(yàn)證。滅菌時(shí)應(yīng)注意排除冷空氣。含糖或特殊培養(yǎng)基應(yīng)按要求選好滅菌溫度及時(shí)間。
13.滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)迅速冷卻到所須溫度,避免長時(shí)間保存在滅菌鍋中,造成過度滅菌,影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分或選擇性效果。
14.配制的培養(yǎng)基的量應(yīng)恰當(dāng),未用完的可注明配制日期,并且應(yīng)該在最長保值期內(nèi)用完。配好的培養(yǎng)基應(yīng)避光、冷藏保存防止蒸發(fā)。
15.凡受污染長過細(xì)菌的培養(yǎng)基,不得滅菌再用。
16.三(雙)糖鐵瓊脂斜面試管塞不宜塞的過緊,否則容易影響斜面堿性反應(yīng);LST如果試管塞過緊,影響排氣,可導(dǎo)致滅菌后小倒管內(nèi)仍有氣泡。
17.需要加添加劑或抗生素的培養(yǎng)基應(yīng)即配即用。
18.固體培養(yǎng)基如儲存太久,使用前應(yīng)再加熱一次,使其表面濕潤以利細(xì)菌生長。