探討細胞培養(yǎng)中血清中有沉淀物的影響
瀏覽次數(shù):267 發(fā)布日期:2022-8-23
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細胞培養(yǎng)中血清中有沉淀物的影響:
1、細胞生長
經(jīng)驗表明沉淀物不會影響細胞培養(yǎng)。
2、過濾
如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物,血清將很難過濾。一般說來,因為在血清生產(chǎn)時最后已經(jīng)經(jīng)過100納米或者40納米的過濾處理,并且經(jīng)過了嚴格的無菌檢測,因此海克隆不推薦再過濾用于細胞培養(yǎng)的血清。在實驗室中沒有必要再過濾處理血清,在大規(guī)模的細胞培養(yǎng)中往往將血清直接加到培養(yǎng)基中一起過濾。
3、污染
磷酸鈣往往被誤認為微生物污染而引起爭端。研究者可能會在血清中觀察到一些絮狀的沉淀,因此就會比較警覺的去做無菌試驗,將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天,結果可能會觀察到更多的絮狀沉淀,因此就斷定血清被污染了。并且當研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時往往可以看到一些可以運動的小黑點,因此 就更加確認是血清被污染了。于是,研究者就會花費更多的時間和精力來和生產(chǎn)商確認,但最終確定血清沒有被污染而只是沉淀。為了避免這些問題的發(fā)生,我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌,而是將血清加到瓊脂板上進行培養(yǎng)以觀察是否有細菌生長。另外,也可以進行革蘭氏染色,在油鏡下觀察,以確認是否有污染。
血清產(chǎn)品使用注意事項(僅供參考):
1、血清解凍采用逐步解凍法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解凍過程中必須隨時輕搖,使血清受熱溫度均勻。
2、血清凝絮物,血清解凍后會出現(xiàn)少量片狀或絮狀物析出,這主要是由于血清內(nèi)不穩(wěn)定蛋白變性、纖維蛋白析出形成沉淀物,實驗證明沉淀物不會影響血清本身質量。
3、熱滅活本產(chǎn)品除注明外均未滅活。如果必須滅活,請嚴格按照56℃30分鐘(水浴)處理已解凍血清。
4、常溫狀態(tài)下短期融化并不會影響血清質量。
5、產(chǎn)品有效期,檢定合格之日起有效期5年。