流動下條件下活細胞實時成像設置詳解
活細胞成像是在流動條件下細胞培養分析的一種可能的體現。
根據實驗的持續時間和溫度要求，有幾種可能的設置具有不同的優點和缺點，本說明中顯示和討論了這些設置。
1. 無需培養箱即可設置設備：
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放置在顯微鏡旁邊的 ibidi 泵系統
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倒置顯微鏡
優點：
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沿灌流管的均勻介質溫度。
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氣泡產生的可能性低。
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在較長時間內非常穩定。
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成本極低且易于操作。
缺點：
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細胞處于室溫。
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沒有向細胞培養基供應 CO2（碳酸鹽緩沖液不起作用）。
適合：
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可以在室溫下培養的細胞或生物。
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沒有細胞的實驗。
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如果細胞耐受溫度下降，則可能用于短期成像。
2. 設置載物臺頂部培養裝置
設備：
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放置在顯微鏡旁邊的 ibidi 泵系統
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ibidi 載物臺頂部培養系統（氣體混合器和溫度控制器）控制舞臺頂部培養室的溫度、二氧化碳和濕度。
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倒置顯微鏡
優點：
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細胞處于適宜的溫度。
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成本低。
缺點：
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沿灌流管的溫度梯度可能有產生氣泡。
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低 CO2 輸入到培養基中。孵育室（提供 CO2）中的暴露時間非常短。
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長期不穩定。
適合：
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短期實驗。
3. 設置載物臺頂部培養裝置和臺式培養箱
設備：
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ibidi 泵系統
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臺式培養箱
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ibidi 載物臺頂部培養系統（氣體混合器和溫度控制器）控制載物臺頂部培養室的溫度、二氧化碳和濕度。
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倒置顯微鏡
優點：
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細胞可以保持在 37°C，因為培養基的冷卻只發生在從培養箱到載物臺頂部培養的管道中。
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CO2 供應提供給儲存器培養基和通道玻片。為獲得最佳 CO2 供應，泵回端口連接到小型培養箱的氣體。
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中長期穩定。
缺點：
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沿灌注管的溫度梯度可能會在長時間內會產生氣泡。
適合：
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細胞需要控溫的長時間培養。
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更長的時間段，帶有額外的氣泡捕集器。
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