名稱 | C2C12 (小鼠成肌細胞) |
別稱 | C2c12;C2-C12;C12 |
種屬 | 小鼠 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 成肌細胞樣 |
傳代融合度 | 70% |
凍存液 | 55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO |
推薦傳代比例 | 1:3 - 1:4 |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
細胞簡介
圖片來源:ATCC
推薦培養體系:
DMEM 【VivaCell C3113】+ 10% FBS 【VivaCell C04002】+ 1% P/S 【VivaCell C3420】
細胞培養步驟
待細胞融合度約70%時即可進行傳代。
以T25培養瓶為例:
吸出原培養液;加入2ml左右PBS【VivaCell C3580】,輕輕晃動培養瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液【VivaCell C3530】,輕輕晃動培養瓶使之浸潤所有細胞后放入培養箱消化約3 min,顯微鏡下觀察多半呈流沙狀,終止消化;(全程不要拍打培養瓶)
離心,300g、3min,離心完吸出上清丟棄;
加入新鮮培養基,將細胞吹到成單個,經計數,均勻接種到新培養瓶中,補足培養基至5ml,放培養箱進行培養。
細胞誘導分化
由于C2C12細胞分化很快,對于研究對理解肌肉細胞發育和修復(再生)是非常重要的。低濃度的馬血清能夠有效刺激C2C12成肌細胞向成熟細胞分化。
我們在這里也簡單介紹下誘導分化的相關知識:
01
誘導體系:
DMEM 【VivaCell C3113】+ 馬血清 【VivaCell C2510】(常見比例為2%)+ 1% P/S 【VivaCell C3420】
02
簡述細胞誘導步驟:
待細胞生長至融合度約過80%時。
用PBS【VivaCell C3580】潤洗細胞后吸出PBS丟棄;
換誘導分化培養基,后續每24h換液一次,在顯微鏡下觀察細胞形態和生長狀況。
03
誘導時刻關鍵步驟:
誘導前提:低代次,細胞狀態很好的C2C12細胞
融合時間:在其融合率剛過80%,換含有馬血清(一般是2%比例)完全培養液。之后需要每天進行換液
誘導時間:正常7天內可成功
提示:誘導的期間會有不少的死亡細胞,也有又成肌細胞的緩慢生長,是正常的
成功的標志:最后可以看見肌管,表現為厚的管狀結構,有時為多核
圖片來源:網絡,侵刪
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