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M2生物芯片點樣儀助力抗體共價偶聯過程及流動特性研究

瀏覽次數:738 發布日期:2024-6-12  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
文獻速遞|M2生物芯片點樣儀助力抗體共價偶聯過程及流動特性研究
 
【Preparative Biochemistry & Biotechnology】Study on covalent coupling process and flow characteristics of antibody on the surface of immunoassay microfluidic chip
抗體在免疫分析微流控芯片上偶聯特性以及流動特性分析



 
微流控芯片集成了樣品反應、處理和分離整個過程,與傳統檢測方式相比,具有體積小、試劑消耗少、檢測時間短、操作方便等諸多特點。因此,被廣泛應用在分子診斷和即時檢測(POCT)領域。

微流控芯片的免疫檢測反應是一個動態過程,需要將反應物持續運送到固相載體表面。目前,大多研究集中在免疫反應的底物上,而對反應物的流量以及流速等特性的研究十分有限。如何結合微流控芯片內部結構得到最佳流速的免疫檢測,成為芯片表面修飾技術急需解決的問題之一。本文研究了幾種聚苯乙烯亞基表面修飾的工藝,用于闡明抗體固定與流速對免疫反應效果的影響。抗體采用共價結合的方式進行固定,基于酶聯免疫吸附原理進行熒光定量檢測及免疫應答過程的評估。另外,以降鈣素原為例,系統地研究了抗體共價偶聯過程和流動特性對免疫檢測結果的影響,為免疫檢測微流控芯片的結構設計提供理論基礎。
  • 作者單位:清華大學精密/超精密制造裝備與控制重點實驗室,清華大學天津先進裝備研究院
  • 期刊:Preparative Biochemistry & Biotechnology 
  • 發表年份:2021年
  • 樣本:蛋白抗體
  • 芯片類型:自制微流控芯片
  • 芯片點樣儀:M2公司iTWO 200生物芯片點樣儀
芯片設計和免疫反應原理如圖1所示:使用德國M2生物芯片點樣儀將標記物(熒光微球)點印在反應區,特異性抗體點印在測試區(僅與感興趣的抗原結合),非特異性抗體點印在對照區(只與標記物或抗原結合)。當含有抗原的血液流經反應區時,抗原在反應區與標記物結合,通過檢測區后,標記抗原被特異性抗體捕獲,形成“抗體-抗原-抗體免疫復合物”,從而產生熒光,當血液流入控制區域時非特異性抗體捕獲未結合的標記抗體。最后使用熒光定量分析儀進行熒光信號分析。

結果顯示:對血液中降鈣素原檢測過程中,研究人員發現平均流速約為0.2 mm/s時免疫反應信號最強;與氨基和醛基修飾相比,環氧基修飾的芯片抗體免疫效率最高,對于小分子基團修飾的芯片,引入聚L -賴氨酸可以增加抗體的固定數量。

原文鏈接:https://doi.org/10.1080/10826068.2021.1958344

M2-Automation成立于2003年,總部位于德國柏林,是一家創新技術開發公司,專注于微量/超微量、非接觸式自動化移液和生物芯片點樣技術。儀器準確性、精確性高,重復性好,全程自動化點樣,同時可根據客戶需求進行定制。
 

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