親和層析法(IMAC)是目前最廣泛使用的純化技術,該技術是基于蛋白表面殘基(組氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等)與過渡金屬陽離子的相互作用而形成螯合,該過渡金屬 / 蛋白絡合物再與螯功能基團鏈接到瓊脂糖微球上,通常通過降低 pH值或添加咪唑的方式來洗脫目標蛋白。
低耐壓
ABT 提供兩種螯合微球,使用標準交聯微球的兩種配基:亞氨基二乙酸(IDA)和次氮基三乙酸(NTA)。
IDA 交聯瓊脂糖凝膠是由亞氨基二乙酸基團通過間隔臂連接穩定的醚鍵組成,IDA 是一種三齒螯合劑,與交聯的瓊脂糖微球共價偶聯。該凝膠載有二價金屬(Ni 2+ , Cu 2+ , Zn 2+ 或 Co 2+ ), 使得該凝膠(即使可用狀態)成為快速純化帶有組氨酸標簽的目標蛋白的理想材料。
與其他螯合凝膠相比,如 NTA 瓊脂糖,IDA 具有三個與金屬離子相互作用的位點,而非四個位點的 NTA。IDA 凝膠通常更易再生,從而可用較低濃度的咪唑更好地洗脫結合的融合蛋白。
該產品范圍涵蓋四種不同類型的金屬離子和兩種不同密度的基團。
- 鎳螯合物可識別兩個暴露的目標殘基(通常是組氨酸)以實現有效的蛋白質結合,推薦用于大多數帶組氨酸標簽的蛋白質純化。
- 鋅螯合物似乎可以識別相鄰位置的兩個暴露的目標殘基,建議用于難以分離的蛋白質。
- 鈷螯合物可識別兩個暴露的目標鄰位殘基,這種填料提供了非常好的選擇性。
- 銅螯合物可識別單個暴露的目標殘留物,這種填料推薦用于難分離的蛋白質。
凝膠的選擇取決于每一次純化的目的或優先級(結合載量 / 特異性)和純化蛋白的類型(純化的難易程度)。
NTA 交聯瓊脂糖凝膠由用次氮三乙酸(NTA)衍生并負載二價鎳離子的瓊脂糖組成,NTA 是一種四配位基的螯合劑,占據鎳離子配位點中的六個結合位點的四個。其他兩個配位點通常被可與重組蛋白的組氨酸殘基相互作用的水分子占據,這種結合最大限度地減少了純化過程中的金屬脫落。
高耐壓
鎳和鈷是 IMAC 純化中最常用的金屬離子,鎳 /鈷 Rapid Run™ 微球整合了金屬離子結合的優勢和 Rapid Run™ 凝膠的高流速。這些產品非常適合大規模的組氨酸標簽(His -Tag)蛋白純化。
Nickel Agarose Extrachel™ 是一種預裝了與配體緊密結合的鎳離子凝膠,在 20 mM EDTA 中孵育后,鎳仍然與螯合配體結合。
低耐壓:螯合瓊脂糖微球和預裝柱
大包裝填料
ABT 提供利用 IMAC 技術的組氨酸標簽(his-tag)蛋白純化填料
- 不同的活化程度以優化結合載量和純化特異性的關系
- 填料螯合有鎳、銅、鋅或鈷離子,也有無金屬離子的
- 可用于批量或純化柱純化
預裝柱
ABT 提供即時可用的重力柱,預裝了利用 IMAC 技術的組氨酸標簽(his-tag)蛋白純化填料快速而簡便的純化
- 快速而簡便的純化
- 用于重力層析
- 無需純化系統
- 提供鎳和鈷兩種金屬離子選擇
- 提供 1ml 和 5ml 兩種規格
低耐壓:鎳NTA瓊脂糖微球和預裝柱
大包裝填料
鎳 NTA 瓊脂糖填料是由次氮基三乙酸(NTA)衍生,并負載二價鎳離子的交聯瓊脂糖組成。這是還原條件下最常用的 IMAC 填料,因為螯合物上有四個金屬結合位點,可實現高蛋白質結合和最小化金屬離子脫落。
- 一步純化
- 高載量
- 原生或變形條件下的純化
- 最小化金屬離子脫離
預裝柱
5ml 的鎳 NTA 瓊脂糖預裝柱是預裝好了的即時可用的產品,可以用于MPLC、FPLC 和 ÄKTA™ 相關的設備上。
ABT 提供1支和5支包裝的 5ml 鎳NTA 瓊脂糖預裝柱。
高耐壓:Chelating Rapid Run™ 瓊脂糖微球
大包裝填料
鎳、鈷和無金屬離子的 Rapid Run™ 瓊脂糖微球是專為對帶有組氨酸標簽的蛋白(His-tag)進行大規模下游純化而設計的,并且比其他市面產品的流速高 70% 。
- 極易放大且經久耐用
- 極高的物理和化學穩定性
- 在最小時間里達到優異的分辨率
預裝柱
5ml 的鎳親和預裝柱用于純化組氨酸標簽(his-tag)蛋白。
- 無需優化或改變操作流程
- 優異的適應性:預裝柱可用于MPLC、FPLC 和 ÄKTA™ 設備
- 與市售產品相比,可一步獲取高純度產物
高耐壓:Nickel Rapid Run™
大包裝填料
該填料由帶有次氮基三乙酸(NTA)配基的高度交聯凝膠制成,該填料可以在含有還原劑的情況下依然具有良好的性能,專為大規模下游純化組氨酸標簽(his-tag)蛋白而設計。
高耐壓:Nickel Agarose Extrachel™
大包裝填料
Nickel Agarose Extrachel™ 是一種用聚螯合劑配體制造的高容量凝膠,該產品是專為在 EDTA 和 DTT 存在下工作而開發,不會造成任何性能上的損失。其特異性和穩定性允許一步純化,無需對可能會導致鎳離子脫落的情況的樣品進行預處理。