文獻信息
山東第一醫科大學第二附屬醫院放射科、首都醫科大學中國醫學研究院等單位的研究成果《The effects of simvastatin on the bone microstructure and mechanics of ovariectomized mice: a micro-CT and micro-finite element analysis study》(辛伐他汀對去卵巢小鼠骨微觀結構和力學的影響:Micro CT和微有限元分析研究)在雜志《BMC Musculoskeletal Disorders》上發表。平生公司的離活一體CT(NEMO)在論文中提供了小鼠椎骨圖像和定量分析。
該研究的通訊作者為秦健教授;第一作者是梁彥博。
文獻摘要
背景:骨質疏松癥是絕經后婦女的主要健康問題,辛伐他汀(Sim)對骨代謝的影響是有爭議的。本研究旨在探討辛伐他汀對去卵巢(OVX)小鼠骨微觀結構和骨力學性能的影響。
方法:將24只8周齡雌性C57BL/6J小鼠隨機分為OVX+Sim組、OVX組和對照組。術后8周,完全解剖L4椎骨,進行微計算機斷層掃描(micro-CT)和微有限元分析(µFEA)。采用方差分析和LSD校正比較三組間的差異,并采用線性回歸分析骨微觀結構與力學性能之間的關系。
結果:OVX+Sim組骨體積分數、骨小梁數量、骨小梁連接密度、骨小梁組織礦物質密度顯著高于OVX組(P<0.05)。通過µFEA檢測的力學性能,OVX+Sim組的總變形、等效彈性應變和等效應力均低于OVX組(P<0.05)。在三組中,力學參數與骨體積分數和骨小梁骨密度顯著相關。
結論:辛伐他汀在骨質疏松癥的治療中具有潛在的作用。本研究結果可以指導未來辛伐他汀的研究,并支持開發以辛伐他汀為基礎的改善骨骼健康的治療方法。
實驗方法
動物準備
選取8周齡雌性C57BL/6J小鼠24只,隨機分為3組,每組8只。8只小鼠行雙側卵巢切除術(OVX),即OVX+Sim組。術后適應4周后,將辛伐他汀溶解于生理鹽水中,以10 mg/kg /天的劑量灌胃小鼠,持續4周。8只小鼠(OVX組)行雙側卵巢切除術。其余8只小鼠(對照組)僅行背部切口,不切除卵巢。然后,OVX組和對照組小鼠在12周齡時接受等量的生理鹽水作為安慰劑,持續4周。各組小鼠的生活環境和飼養條件相同。在整個實驗期間,小鼠可以隨意獲得標準的食物顆粒和水。16周齡時,各組小鼠采用戊巴比妥鈉(150 mg/kg)過度麻醉安樂死,完全取出L4椎骨。
Micro CT掃描
使用平生醫療(昆山)有限公司的NEMO微型CT(型號NMC100)檢查L4椎骨的所有小梁骨。所有樣品沿長軸垂直放置在樣品艙中。使用的掃描設置如下:源電壓為90kv;電流50µA;掃描時間10min;體素大小0.015×0.015×0.015 mm;投影數量4000個。掃描后,作者使用Avatar v1.6.5 (平生醫療科技有限公司)軟件進行三維重建。感興趣體積(VOI)。作者采用閾值分割、區域生長、形態學運算和布爾運算等分割算法,采用閾值為700提取軟組織和骨髓相的礦化骨。根據顯微CT掃描結果評估骨體積分數(BV/ TV)(%)、骨小梁厚度(Tb.Th)(mm)、骨小梁數量(Tb.N)(1/mm)、骨小梁間距(Tb.Sp) (mm)、結構模型指數(SMI)、骨小梁連接密度(connd)(1/mm3)、骨小梁組織礦物質密度(Tb.TMD) (g/cm3)。所有測量均由一名初級醫師在一名高級醫師的指導下進行。
實驗結果
三組間在BV/TV、Tb.Th、Tb.N、Tb.Sp和Tb.TMD 指標組內差異顯著 (P<0.05)。相比之下,三組間椎骨SMI組內差異無統計學意義(P>0.05)。其中,OVX+Sim組BV/TV、Tb.N、Conn.D和Tb.TMD顯著增加。雖然沒有顯著差異,但與OVX組比較,OVX+Sim組有更多的Tb.Th和更少的Tb.Sp (表1)。有趣的是,OVX+Sim組的Tb.N、Conn.D顯著高于對照組(P<0.05)。OVX+Sim組的SMI與對照組無顯著差異(P>0.05)(表1)。此外,OVX組的BV/TV、Tb.Th、Tb.N和Tb.TMD與對照組相比均有顯著降低 (表1)。此外,三維重建顯示,OVX+Sim組的小梁密度明顯高于對照組和OVX組(圖3A和C)。
圖1 所關注的體積為綠線內骨小梁的體積A.冠狀像 B.矢狀像 C.軸向像
表1. 三組骨微觀結構參數比較
圖3 各組最接近平均水平小鼠L4椎骨的微CT三維重建及截面圖 a對照組 b OVX組 c OVX+Sim組
使用結論
綜上所述,本研究結合micro-CT和µFEA表明辛伐他汀治療對去卵巢小鼠的骨微觀結構和力學性能有積極的影響。雖然OVX誘導的雌激素缺乏骨質疏松模型可能無法全面模擬臨床病理情況,但作者的研究結果為辛伐他汀治療骨質疏松癥的潛在臨床應用提供了新的見解。
使用設備
Micro CT (型號:NEMO) (平生醫療科技)
影像軟件:Avatar(平生醫療科技)