MH培養基如何滅菌最合適以及MH培養基的使用方法
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微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫,指的是水解酪蛋白。而MH培養基指的就是水解酪蛋白(Mueller-Hinton)培養基,可配置成MH血瓊脂培養基用于鏈球菌的藥物敏感實驗。本文主要介紹的是MH培養基如何滅菌最合適以及MH培養基的使用方法。
MH培養基如何滅菌
MH培養基可用濕熱滅菌法,115度30分鐘,作分離馴化蛋白酶的菌。
MH培養基的使用方法:
1、 稱取本品38g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用.
2、 試驗菌液的制備:從TSA平皿上挑取3-5個形態相似的菌落頂端部分接種MHB或TSB培養基.經36±1℃培養4-6小時后,比濁至0.5麥氏單位.
3、 接種:用無菌棉拭浸取比濁好的菌液,在管壁內輕輕轉壓除去過多菌液,然后再輕輕涂抹培養基,每一平皿涂抹三次.每次涂抹后均需將平皿轉動60度,再行下一次涂抹.每一質控菌株涂抹三個平皿.
4、 貼片:接種后的平皿置室溫片刻,待稍干后,用無菌鑷子將抗生素紙片均勻貼布于平皿瓊脂表面.各紙片間中心間距不得小于24mm,紙片距平皿邊不得小于15mm.一旦紙片接觸瓊脂表面,即不可再移動,因此時藥物已開始擴散.
5、 培養:紙片貼妥后,在15-30分鐘內,將平皿翻過來置于36±1℃培養16—24h后,觀察結果.平皿培養時不宜堆放,以二個相疊為宜.