支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)室中最常見污染之一，保守估計(jì)常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中有15–35%存在支原體污染。

什么是支原體？

支原體（mycoplasma）是一類沒(méi)有細(xì)胞壁、高度多形性、能通過(guò)濾菌器、可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖的最小原核細(xì)胞型微生物，大小為0.1-0.3微米。

典型的支原體污染來(lái)源：

支原體污染可能來(lái)自培養(yǎng)基、血清或?qū)嶒?yàn)操作者，會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)率、細(xì)胞形態(tài)、基因表達(dá)、細(xì)胞代謝和細(xì)胞活力。支原體感染不易察覺，因此對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞定期進(jìn)行支原體檢測(cè)就非常重要。

– 未檢測(cè)細(xì)胞之間交叉污染

– 移液時(shí)產(chǎn)生的氣霧

– 不同的細(xì)胞使用同一瓶的培養(yǎng)基

– 已污染的物質(zhì)

– 已污染的捐獻(xiàn)組織（<1%）

– 來(lái)自實(shí)驗(yàn)者的直接污染

                  

細(xì)胞支體污染的后果？

支原體生長(zhǎng)緩慢，不會(huì)馬上使細(xì)胞致死， 但會(huì)影響細(xì)胞內(nèi)的各種參數(shù)。

由于支原體污染會(huì)嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性、重復(fù)性以及一致性。這是基礎(chǔ)研究中一個(gè)主要問(wèn)題，同時(shí)也是生物產(chǎn)品制造中的一個(gè)主要問(wèn)題。所以對(duì)支原體的常規(guī)檢測(cè)是一個(gè) 非常重要的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。

現(xiàn)行檢測(cè)方法

Lonza MycoAlert支原體檢測(cè)試劑盒：

20分鐘 之內(nèi)檢測(cè)支原體污染

來(lái)自lonza的MycoAlert支原體檢測(cè)試劑盒是檢測(cè)支原體酶活性的生化檢測(cè)方法。

支原體酶廣泛存在180多種支原體以及主要六大支原 體污染細(xì)胞培養(yǎng)物中，但是在真核細(xì)胞中卻沒(méi)有。因此檢測(cè)支原體酶的有無(wú)成為快速、靈敏的篩查支原體污染的標(biāo)準(zhǔn)。

搭配的Lonza Lucetta™2支原體檢測(cè)儀可以用于檢測(cè)生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光。

它采用特定模式進(jìn)行設(shè)計(jì)，可用于Lonza的MycoAlert™支原體檢測(cè)測(cè)定，也可用于許多其他基于發(fā)光的測(cè)定，例如細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性測(cè)定或熒光素酶報(bào)道基因測(cè)定。

優(yōu) 點(diǎn)：

• Fast-20分鐘內(nèi)即可診斷出你的培養(yǎng)是否健康無(wú)污染，而其它方法一般要幾個(gè)小時(shí)到數(shù)周的時(shí)間。

   

• Convenient-只需把你的培養(yǎng)物與兩種試劑混合配成100ul，在Lucetta™2支原體檢測(cè)儀上讀2次數(shù)。

   

• Universal-可以檢測(cè)所有支原體和無(wú)膽甾原體在常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

   

• Sensitive-可檢測(cè)<50 cfu/ml的支原體，避免出現(xiàn)像PCR和熒光染色方法出現(xiàn)的陰性結(jié)果。

   

• Complete-該支原體檢測(cè)試劑盒包含實(shí)驗(yàn)所需的所有試劑，而不像商業(yè)PCR檢測(cè)方法中需要你提供PCR酶、核酸、限制性內(nèi)切酶和瓊脂糖電泳所需的其它試劑。