作為勤勤懇懇的科研人,想必大家做PCR實驗已經非常得心應手了,但依舊擺脫不了跑膠失敗,PCR一遍遍做,莫名其妙,也找不到原因。小伙伴關注引物是不是有問題,試劑是不是不好等因素。PCR擴增儀的好壞也是我們常常忽略的一個點,PCR擴增儀主要由熱循環系統組成,而其中最關鍵的就是半導體導熱模塊和樣品槽。
溫控性能是影響PCR反應的關鍵因素
由PCR原理也可看出,PCR反應是不斷升溫和降溫的過程。需要能在變性-退火-延伸這三個關鍵步驟進行溫度控制。溫度控制涉及溫度準確性、均一性、升降溫速率、溫度梯度等多個方面!
溫度準確性是PCR儀的重要性能指標。如果儀器溫度準確性差,樣品槽的實際溫度不能達到設定溫度,那就無法獲得預期的擴增結果,即要么擴增不出來,要么產生非特異性擴增甚至是錯誤擴增。
溫度均一性是獲得穩定擴增的保障。若PCR儀的溫度均一性差,在出現不同擴增結果時就無法判斷是樣品本身不同造成還是儀器性能不好所導致。
樣品槽材質是影響PCR儀溫控性能的關鍵因素
PCR儀樣品槽的材質會影響上述溫控方面的性能,一旦PCR儀的導熱性能不好,就會導致PCR的擴增效率不行,進而影響最終結果。目前PCR樣品槽主要分為幾種材質:鋁合金槽、銀質槽、鍍金槽等。其中鍍金槽成本最高,但也是性能最好的(艾普拜生物精衛自動PCR儀-采用鍍金槽),下面我們一起來看看鍍金槽作為成本最高的材質,優勢到底在哪?
其優勢主要體現在:
① 優異的熱傳導性能:
- 金是一種良好的熱導體,鍍金槽能夠快速且均勻地傳遞熱量,使PCR反應體系中的溫度變化更加迅速和準確。這對于PCR反應中變性、退火、延伸等不同溫度階段的精確切換非常重要,可以提高反應的效率和特異性,減少非特異性擴增的出現。例如,在一些對溫度變化要求極高的PCR實驗中,鍍金槽的快速熱傳導性能能夠確保反應的順利進行。
- 與普通的鋁合金材質樣品槽相比,鍍金槽的熱傳導性能更優,能夠在更短的時間內達到設定的溫度,從而縮短整個PCR反應的時間,提高實驗的效率。
② 良好的溫度均勻性:在PCR反應過程中,溫度的均勻性對于反應結果的穩定性和重復性至關重要。鍍金槽的材質特性使得熱量能夠在槽內均勻分布,確保每個樣品孔位的溫度基本一致。這樣可以避免因溫度差異導致的部分樣品擴增效果不佳或結果不準確的問題,提高實驗結果的可靠性和可重復性。
③ 抗腐蝕性強:金是一種化學性質非常穩定的金屬,具有很強的抗腐蝕性。在PCR實驗過程中,經常會使用各種化學試劑,如緩沖液、酶等,這些試劑可能會對樣品槽產生一定的腐蝕作用。而鍍金槽能夠有效地抵抗這些化學試劑的侵蝕,保證樣品槽的長期穩定性和使用壽命。
④ 表面光滑度高:鍍金層的表面光滑度較高,這有利于樣品的放置和取出,減少樣品在槽內的殘留,降低交叉污染的風險。同時,光滑的表面也便于清潔和維護,保持樣品槽的清潔度,確保實驗結果的準確性。
想必大家對普通PCR的熱循環系統的硬件尤其是樣品槽已經有了很深的認識了,相信大家對于如何選擇合適的PCR儀也已經心中有數。
精衛自動PCR儀
精衛自動PCR儀有Kingwell 96、Kingwell 96DW和Kingwell 384三款型號可選,能夠滿足不同通量的實驗需求。所有型號均采用鍍金樣品槽,能夠帶來更好的溫控性能和更快的升降溫速度。同時所有型號均采用簡潔現代的外觀設計,搭配10.1英寸彩色觸控屏和智能化操作系統,帶來更高效便捷的實驗體驗。
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