培養基廢液抽吸是實驗室中移除培養容器(如細胞培養皿、搖瓶、生物反應器等)中廢棄培養基的過程,常用于細胞培養、微生物培養或發酵實驗后的廢液處理。具體操作時常用的儀器包括以下三種:
1.手動吸液器:如移液槍或電動移液器,因為吸液量受限于槍頭和吸液管的容量,僅適用于小規模或微量廢液抽吸。
2.電動的真空抽吸泵:通過機械或物理方式從密閉容器中抽出氣體,形成負壓真空環境。在培養基廢液抽吸中,負壓用于將液體吸入收集容器,相比手動方式,能高效抽吸液體。
3.中央真空系統:大型實驗室常用,需連接管道和廢液收集裝置,一般需要在實驗室建筑物設計階段就已經準備好相關方案,且建設成本高。
在上述幾種常用的培養基吸液設備中,由于電動的真空抽吸泵兼顧經濟性、效率和購置便利度,所以目前使用最多,下面我們再來分析一套完整的用于培養基廢液抽吸的真空泵包括哪些組成部分:
●主機——培養基廢液抽吸泵的主機一般內置了一臺無油負壓真空泵,通過真空泵的抽氣,將整個系統的集液瓶、管路等各部件中的空氣抽到一定的真空度,實現一定的負壓從而使需要抽取的培養基上清液被抽走。這里需要特別注意的是,由于是在潔凈室細胞房內使用,所以其真空泵必須是無油插電即用的,不能使用循環水真空泵或者是旋片式油泵。此外真空泵的吸力和抽氣速率需要與吸液量和集液瓶的容量相匹配,否則會出現吸不動或者是抽速太慢的問題。如BSUD-S204P4A實驗室細胞培養基上清廢液真空抽吸系統,不同于常見的塑料外殼吸液泵,采用全不銹鋼材質制作機體外殼,可耐受紫外燈照射和75%酒精擦拭消毒滅菌,不銹鋼外殼內部有一臺無油真空泵,為系統提供負壓吸引力。
●真空表和調節閥——真空表可以顯示主機內負壓真空泵的真空度。在實際使用中,真空表的作用除了可以搭配調節閥一起使用來調整吸力和抽速外,還可以用其來判斷儀器的工作狀態、排除建議故障,是實用性很高的一項附件。由于廢液抽吸系統是由多個固件和附屬件組成的,出現不能正常吸液的問題時,不能簡單歸結為是主機的故障,有可能是管路連接錯誤、阻水保護器堵塞、廢液瓶蓋未蓋緊漏氣、吸頭未裝到位等等多種原因。通過真空表就可以逐段測試是哪一段真空度不足,就可以判斷出問題原因,及時處理。調節閥則可以根據實際需要來改變吸力和抽速,該調節功能可以確保吸液的同時,又使得不會因為吸力過強將細胞抽走。BV240A標配了這兩項附件,能夠提升使用的便利性。
●真空泵管和吸液管——真空泵管是指連接真空泵抽氣口至集液瓶抽氣接口的這一段,而吸液管則是指連接集液瓶的吸液接口和吸頭適配器這一段。對于這兩種管子的要求都是相同, 能夠耐受負壓,抽吸時不會被吸癟,同時需要使用無粉塵、原料干凈的鉑金硫化硅膠管,以確保不會污染培養的細胞。此外真空泵管和吸液管長度都要符合使用要求,一般真空泵管不超過1米,過長會影響吸力和抽速,同時拖沓的管路反而會影響真空泵和集液瓶的連接。而吸液管的長度一般為2米,這是因為大部分的培養基廢液抽吸裝置都會被擺放在超凈工作臺或生物安全柜的臺面下方,通過吸液管將吸頭適配器伸入臺面內使用。
●真空集液瓶——用戶在具體選型時,可以根據吸液量,使用頻率來選擇集液瓶的容量。但是需要注意的是不能根據單次吸液量來選擇容量,這是由于大部分客戶都不會再每次吸液后處理集液瓶,一般是瓶內液位即將裝滿時集中處理廢液,并進行滅菌。所以可以適當購買容量較大的集液瓶。同時和家用的吸痰器(個人使用沒有無菌要求)或醫用吸液器(使用醫療專用的一次性吸液袋)相比,實驗室培養基廢液吸取泵的集液瓶需要進行121度高溫高壓滅菌,此外由于非每次實驗后滅菌,一般還會加入稀釋后的次氯酸鈉防止長菌,所以集液瓶的材質需要耐受溶劑。有一些用戶也比較喜歡選擇雙廢液瓶的機型,如BV235雙廢液瓶實驗室廢液吸取裝置,標配2只容量1.5L的真空集液瓶,雙廢液瓶的配置能提供豐富的使用方法,更靈活便利,包括:2只同時收集廢液擴展容量;1只收集廢液1只做緩沖瓶保護;2人同時吸液互不影響;1只滅菌時另1只繼續使用。
●腳踏開關和手持控制器——如前所述,由于培養基廢液抽吸裝置都會被擺放在超凈工作臺或生物安全柜的臺面下方,通過吸液管將吸頭適配器伸入臺面內使用,用戶在操作時還需要帶上手套,如果每次都將手移出臺面,去操作主機上的開關,會造成污染,這就需要使用外控附件來進行控制。BV240A就標配包含了開關和手持控制器兩種外控附件。腳踏開關是使用腳踩的方式來控制主機的啟停,而手持控制器則是通過手握,用大拇指按壓上面的按鈕來控制液體的吸停。這兩種方式都能實現對液體吸停的控制,避免去使用主機上的開關來操控。對于需要控制采購預算的用戶來說,也可以選擇只帶有其中一種控制方式的機型。
●吸頭適配器套件組——吸頭適配器的一端連接吸液管,另一端可以連接各種規格的一次性tip槍頭。吸液時通過查收一次性槍頭的吸頭適配器來實現吸液。一般根據培養的器皿來選擇對應的吸頭適配器,如果是培養皿可以使用單道短吸頭(BS-K-1EJ)、培養瓶由于較深需要使用能夠連接1000ul槍頭的單道長吸頭(BS-K-1)、而抽吸96孔培養板時就需要使用8道吸頭適配器(BS-K-8EJ)。
●防倒吸進水保護套件組——在實際日常操作中,會由于各種意外情況或者其他原因,造成液體沒有吸入集液瓶內保存,而被抽入真空泵內,真空泵作為帶有電子部件的機械設備,進水也會產生故障。所以一款合格的培養基廢液抽吸產品都會配有防倒吸阻水套件來避免這種情況的方式。圣斯特品牌經濟基礎型的廢液抽吸產品,如BV300E,也帶有三道式防倒吸保護,包括浮球逆止閥、防倒吸阻水保護器和緩沖杯。浮球逆止閥的作用是當廢液瓶即將裝滿時自動關閉抽氣口,防止大量液體溢出進入真空泵管內;而防倒吸阻水保護器則是由疏水性材料制造,空氣可以通過但是液體不能通過,在正確連接和使用的情況下,可以100%阻擋倒吸。
具體使用時,還需要注意如下事項:
1.無菌操作:在生物安全柜或超凈工作臺內操作,避免污染培養物或環境。吸液瓶、吸液管等部件使用前需高壓滅菌或使用一次性無菌產品。
2。避免交叉污染:不同樣本的廢液使用獨立吸頭,避免混用。及時處理廢液收集瓶,避免過滿導致倒吸。
3.安全處理廢液:需高壓滅菌或化學滅活后再按實驗室規范丟棄。
4.設備維護:定期清潔抽吸管道,防止殘留物堵塞或滋生微生物。真空泵的阻水保護濾器及時更換,避免廢液或氣溶膠進入泵體。
5.吸液時的技巧:控制抽吸速度。避免液體飛濺或產生氣溶膠。吸液管口避免觸碰容器底部,防止吸入細胞或沉淀物。