Union BioMetrica COPAS 大顆粒流式系統應用
C13C4.5/Spinster,一種進化上保守的蛋白作用于脂肪代謝而對線蟲生育能力做出調控 | ||
C13C4.5/Spinster, an evolutionarily conserved protein that regulates fertility inC. elegans through a lysosome-mediated lipid metabolism process | ||
Mei Han, Hao Chang, Peng Zhang, Tao Chen, Yanhua Zhao, Yongdeng Zhang, Pingsheng Liu, Tao Xu, Pingyong Xu | ||
Protein & Cell May 2013,Volume 4,Issue 5,pp 364-372 | ||
中科院生物物理所徐濤教授團隊采用Union BioMetrica COPAS 大顆粒流式系統于本年在國際知名刊物 “蛋白與細胞” 中發表——C13C4.5/Spinster,一種進化上保守的蛋白作用于脂肪代謝而對線蟲生育能力做出調控。(Protein & Cell, May 2013,Volume 4,Issue 5,pp 364-372)。 | ||
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脂滴在幾乎所有的物種都存在的細胞器,它的主要作用是儲存中性脂肪。了解脂滴的調控中模式,將有利于解決肥胖和其他脂肪相關疾病。在本研究,研究員選擇了11種可能跟線蟲 (Caenorhabditis elegans.) 脂質代謝相關的候選RNAi控制序列。使用Union BioMetrica COPAS 大顆粒流式細胞儀,配備BODIPY 493/503 激光進行分析, 研究員發現其中有6個候選序列對脂肪儲存負向控制,有3個候選對脂肪儲存是正向控制。研究員選擇了其中一個負調節RNAi C13C4.5作為后續研究。 |
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C13C4.5主要表達于線蟲腸道。研究員發現,C13C4.5是維持脂滴代謝的重要基因。生化分析結果發現,在敲除C13C4.5基因的線蟲中,50%的三;视停═AG)丟失。受激拉曼散射(SRS)信號顯示C13C4.5突變型與野生型相比,突變型49.6%的脂肪含量在腸道的近端區域, 而野生型86.3%的脂肪含量在腸道前端區域。C13C4.5基因敲除線蟲與野生型比較,其脂滴的大小和信號強度平均值顯著下降。LMP-1標記的膜結構在C13C4.5突變型線蟲腸道也增大。最后C13C4.5(ok2087) 突變型中也發現生育缺陷?偠灾@些結果表明,C13C4.5可能是通過干擾溶酶體的形態和功能而調節線蟲脂滴脂肪含量和大小,并間接對生育機能做出調控。 | ||
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模式動物如線蟲,斑馬魚等、模式植物種子、大體積細胞(干細胞團,3D細胞球隊)及微球的分選在生命科學研究中有著非常廣泛的應用,但是由于這些對象體積太大,普通流式細胞儀難以對其進行分選,而手工鏡下分選耗時耗力、效率低下、準確性難以保證,Union Biometrica公司出品的COPAS蠕蟲/胚胎流式分選系統/多參數生物微粒分析與分選系統, 是市面上唯一能對大顆粒進行分析與分選的流式細胞儀。 |