LaVision UltraMicroscope光片顯微鏡——結合新型透明化方法,實現動物整體透明化并成像
瀏覽次數:6442 發布日期:2019-3-28
來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
通過對各種疾病的觀察與研究,我們現在廣泛認識到:大部分疾病,起源于身體的一部分,但最終都會影響到整體。這意味著,對于疾病的整體性研究至關重要。傳統的組織病理成像的研究方法,更側重于單個器官、組織的病理形態觀察與檢測,整體的病理研究需要一種能夠完整地保存整個機體的形態并整體成像的方法。接下來我們將介紹Ali Erturk教授開發的vDISCO組織整體透明技術并使用LaVision UltraMicroscope光片顯微鏡進行動物整體成像。
視頻1:vDISCO透明方法視頻演示
(1)高壓強灌注是vDISCO的核心步驟(2)vDISCO透明化后,光通過動物體不產生折射(3)完整的神經系統(4)可以通過透明的顱骨觀察到腦膜的血管分布(5)整體透明后,單獨神經的標記區分可以在整個動物體中進行
動物整體透明化的難點在于動物內部由于組織厚而密集,透明化程度相對較低,同時熒光標記難以深入組織內部。vDISCO使用高壓強的液體來執行心臟灌流,從而更徹底地清除血液等影響透明效果的因素,同時使熒光免疫標記能夠達到更深層的組織實現整體均勻標記。
UltraMicroscope光片顯微鏡可以容納整個動物進行整體成像
視頻2:光片顯微鏡成像過程視頻演示
透明化完成后,余下的問題就是應該如何對大組織樣本進行整體成像。LaVision UltraMicroscope具有8*8*5cm3的超大樣品腔,可以容納整個動物進行整體成像。vDISCO的極佳整體透明化效果與LaVision UltraMicroscope光片顯微鏡的大樣品整體成像結合,使得疾病的宏觀整體研究不再是水中月。
小鼠的整體神經連接。肌肉(紅色);骨與器官(白色);神經系統(綠色)