穩定同位素內標物/標記物的介紹
瀏覽次數:8879 發布日期:2019-8-9
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同位素標記 (同位素內標)較于其同種元素的未標物具有質子數相同中子數變化的特點,通過用同位素取代特定原子來標記反應物,然后使反應物進行反應,并檢測中子數變化的原子,可
通過反應、代謝途徑或細胞跟蹤同位素。
同位素內標物與對應的未標物理化性質相似,通過光吸收和免疫的方法無法區分,在色譜中如果將同位素內標物與對應的未標物用同樣的檢測方法,其保留時間也幾乎一致,無法分辨。
穩定性同位素內標是質譜方法即穩定性同位素稀釋法獨有的,在質譜(Mass)中,如果加進同位素內標,那測出來的值較未標物有很大的差值,質譜能把同位素內標和要檢測的物質區分開。
上海甄準生物可供多種穩定同位素標記的內標,包括2H (氘標 D) 、13C、15N、17O、18O、34S等,放射性的同位素內標具有較大的傷害性,一般穩定性同位素可以完成的建議優選穩定性同位素內標物,若被檢測物是穩定同位素內標物對應的未標物,那么,較被檢測物而言,對應的同位素標記物只是將部分氫原子(1H)、碳原子(12C)或氮原子(14N)等被2H (氘、D)、13C、15N所取代,被檢測物與對應的穩定同位素內標物理化性質基本一致,尤其在色譜中,幾乎無法區分。
同樣是穩定同位素標記,13C、15N相對來說比2H(氘標) 更好,所以氘標(D、2H)一般也相對而言更便宜,色譜定量中,2H、13C、15N標記的差別不大,如果需要質譜(MS)或者核磁(NMR)定量,一般建議優選13C或者15N標記。
目前同位素內標廣泛應用于檢測中:包括維生素檢測、膽汁酸檢測、激素檢測、兒茶酚胺檢測等。