前情回顧：好物品鑒，生物素及其衍生物產品力薦

 

       上一期我們給大家介紹了目前在生化實驗中被廣泛使用的生物素-鏈霉親和素結合系統，以及其中的第一個成員——生物素及其衍生物以及他們的一些常規的應用，今天給大家帶來了該系統中另外一個重要的成員——鏈霉親和素及其衍生物，與生物素類似，鏈霉親和素分子本身也較小，同時也可以與生物活性大分子（例如抗體）廣泛結合而不會對其功能產生影響，因而得到廣泛的使用。為方便大家的研究工作，今天就給大家帶來了全套的鏈霉親和素及其衍生物相關產品。

 

       1. 酶標記的鏈霉親和素結合物

 

       酶標記的鏈霉親和素綴合物通常用于酶聯免疫吸附測定（ELISA），免疫組化（IHC），免疫印跡（WB）和原位雜交技術（FISH）。辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（ALP）因其周轉率高，穩定性高，易于綴合和成本低等優點而被廣泛用作報告標簽。

 

       為了最大程度地保留酶和蛋白質活性，我們的HRP-鏈霉親和素和AP-鏈霉親和素偶聯物的標記比例為1：1（酶對鏈霉親和素）。顯色，熒光和化學發光的底物均可用于這些酶結合物。

 

 

       FFPE肺腺癌組織中EpCAM的IHC檢測：將人腺癌組織切片與兔抗EpCAM一抗隨后進行生物素化的山羊抗兔IgG（H＆L）孵育。然后將樣品與HRP-鏈霉親和素一起孵育，并使用ReadiUse™ Stayright™ Purple（Cat# 45900）進行顯色。

 

產品名稱	酶類	規格	貨號
HRP-鏈霉親和素綴合物	辣根過氧化物酶（HRP）	1mg	16920
AP-鏈霉親和素綴合物	堿性磷酸酶（AP）	1mg	16921

 

       2. HRP底物：
 

產品	檢測方式	Ex（nm）	Em（nm）	規格	貨號
ReadiUse™ABTS	發光法	420	——	1L	11001
ReadiUse™TMB	發光法	650	——	100 ml	11012
ReadiUse™TMB	發光法	650	——	1L	11003
Amplite™ADHP	熒光法	571	584	25 mg	11000
Amplite™藍色	熒光法	324	409	25 mg	11005
Amplite™紅色	熒光法	571	584	1000 tests	11011
Amplite™紅外	熒光法	648	668	1 mg	11009
魯米諾	化學發光	355	412	1 g	11050

       

       3. AP-鏈霉親和素綴合物及底物：

 

產品名稱	檢測方式	Ex（nm）	Em（nm）	規格	貨號
pNPP * CAS 4264-83-9 *	比色法	405	——	25 mg	11619
FDP * CAS 217305-49-2 *	熒光法	498	517	5 mg	11600
MUP，二鈉鹽* CAS 22919-26-2 *	熒光法	360	448	25 mg	11610
MUP，二鈉鹽* CAS 22919-26-2 *	熒光法	360	448	10 g	11612
DiFMUP	熒光法	358	450	5 mg	11627
SunRed™磷酸鹽	熒光法	653	661	5 mg	11629
磷酸D-熒光素* CAS 145643-12-3	化學發光	——	——	5 mg	12512

 

       4. 熒光鏈霉親和素綴合物

 

       熒光鏈霉親和素偶聯物廣泛用于熒光成像中，以檢測生物素化的抗體，配體和DNA探針，用于原位雜交技術（FISH），免疫組織化學（IHC）和多色流式細胞術（FC）。我們提供了一系列完整的熒光鏈霉親和素標記，這些熒光素標記有iFluor™染料，mFluor™染料，藻膽蛋白和串聯染料等。我們的iFluor™鏈霉親和素偶聯物的優勢包括：具有異常明亮的熒光，出色的光穩定性和對pH值不敏感等特性。

 

       iFluor™鏈霉親和素綴合物

 

       用iFluor™染料標記的鏈霉親和素綴合物具有異常明亮和穩定的熒光，勝過Alexa Fluor®和其他光譜相似的綴合物。iFluor™鏈霉親和素偶聯物設計用于多種細胞分析和蛋白質分析應用，包括成像（IF），流式細胞術（FC）和熒光免疫印跡。作為提醒，在檢測低豐度靶標時避免使用藍色熒光鏈霉親和素偶聯物。藍色熒光染料具有較低的熒光，并且比其他染料具有更高的非特異性背景。

 

 

        HeLa細胞中α-微管蛋白的免疫熒光染色：將固定和透化的HeLa細胞中的α-tubulin與兔抗tubulin一抗一起孵育，然后與生物素化的山羊抗兔IgG（H＆L）（Cat# 16794）進行孵育，然后加入iFluor™647-鏈霉親和素偶聯物（Cat# 16966），使用DAPI（Cat# 17507）對細胞核進行復染。

 

       ①. 用于成像和流式細胞術的iFluor-鏈霉親和素綴合物：

 

產品名稱	Ex / Em（nm）	濾光片組	消光系數	FQY²	規格	貨號
iFluor™350鏈霉親和素	344/448	DAPI	20,000	0.95	1 mg	16980
iFluor™405鏈霉親和素	402/425	DAPI	37,000	0.91	1 mg	16982
iFluor™488鏈霉親和素	491/516	FITC	75,000	0.9	1 mg	16985
iFluor™514鏈霉親和素	527/554	TRITC	80,000	0.83	1 mg	16986
iFluor™532鏈霉親和素	543/563	TRITC	90,000	0.68	1 mg	16987
iFluor™546鏈霉親和素	541/557	TRITC	100,000	0.67	200 mg	16958
iFluor™555鏈霉親和素	556/569	TRITC	100,000	0.64	1 mg	16989
iFluor™568鏈霉親和素	568/587	TRITC	100,000	0.57	200 mg	16960
iFluor™594鏈霉親和素	587/603	Texas Red	180,000	0.53	1 mg	16992
iFluor™633鏈霉親和素	638/652	Texas Red	250,000	0.29	1 mg	16995

 

       ②. mFluor™鏈霉親和素偶聯物用于流式細胞術：

 

       用mFluor™染料標記的鏈霉親和素偶聯物具有最小的自發淬滅，可為流式細胞儀產生強烈的熒光和穩定偶聯物。mFluor™鏈霉親和素偶聯物設計用于通過流式細胞儀中常用的主要激光線之一（例如405 nm，488 nm，532 nm，561 nm或633 nm激發光）進行最佳激發。

 

 

       用（紅色）或不用（綠色）1ug / ml生物素標記的抗人HLA-ABC的HL-60細胞的流式細胞分析，然后添加mFluor™Blue 570-鏈霉親和素偶聯物（Cat# 16935）。

 

       用于流式細胞術的mFluor™鏈霉親和素綴合物：

 

鏈霉親和素綴合物	Ex（nm）	Em（nm）	濾光片組（nm）	貨號
mFluor™紫色450鏈霉親和素	405	444	450/40	16930
mFluor™紫色510鏈霉親和素	408	503	525/50	16931
mFluor™紫540鏈霉親和素	393	536	525/50	16932
mFluor™藍色570鏈霉親和素	505	564	575/26	16935
mFluor™Green 620鏈霉親和素	522	621	610/20	16938
mFluor™黃色630鏈霉親和素	609	626	610/20	16942
mFluor™Red 700鏈霉親和素	685	704	730/45	16946
mFluor™紅色780鏈霉親和素	629	780	780/60	16948

       ③. 鏈霉親和素APC，PE，PerCP組成串聯染料偶聯物用于流式細胞術：

 

       鏈霉親和素PE，APC和PerCP偶聯物通常用于需要高靈敏度但不需要光穩定性的應用中，主要是流式細胞，FACS，免疫表型和微陣列。藻膽蛋白異常明亮的熒光是由于它們異常高的消光系數和量子產率。

 

       串聯染料偶聯物是將供體藻膽蛋白（例如APC或PE）標記到受體iFluor™染料上，后者在較長波長下發出熒光。使用熒光共振能量轉移（FRET），供體藻膽蛋白吸收的光導致受體的熒光發射。在流式細胞儀中，串聯染料非常適合用于細胞的多色參數分析，這是因為它們利用的是單個激發光源并且其斯托克斯位移（Stokes shifts）非常大。

 

       用于流式細胞的鏈霉親和素APC，PE，PerCP和串聯染料偶聯物：

 

鏈霉親和素綴合物	Ex（nm）	Em（nm）	過濾器組	貨號
RPE鏈霉親和素	564	574	575/26	16900
APC鏈霉親和素	651	660	660/20	16902
PerCP鏈霉親和素	477	678	695/40	16905
RPE-iFluor™647鏈霉親和素	568	666	670/14	16906
RPE-iFluor™750鏈霉親和素	566	778	780/60	16907
APC-iFluor™750鏈霉親和素	651	791	780/60	16908
RPE-Cy7鏈霉親和素	566	778	780/60	16916

 

       ④. 鏈霉親和素-Xtra™綴合物：

 

       鏈霉親和素-Xtra™iFluor™偶聯物可用于細胞成像，流式細胞(FC)和蛋白質印跡(WB)等應用中生物素化抗體的檢測，從而產生最亮的熒光。與傳統的AlexaFluor®鏈霉親和素綴合物相比，Xtra™iFluor™鏈霉親和素綴合物可對低豐度目標蛋白進行成像，具有更高的靈敏度和細節。

 

       鏈霉親和素-Xtra™綴合物優點：

 

       明亮且穩定的熒光，無明顯的自發淬滅

       較高的信噪比：與AlexaFluor®相比，信號改善了3-5倍

       在較寬的摩爾范圍熒光內不受pH影響

 

 

用鏈霉親和素-Xtra™IF488和鏈霉親和素-AlexaFluor®488染色的HeLa細胞的比較

 

       鏈霉親和素-Xtra™綴合物：

 

鏈霉親和素綴合物	Ex（nm）	Em（nm）	濾光片組	貨號
鏈霉親和素-Xtra™iFluor™488	491	516	FITC	46001
鏈霉親和素-Xtra™iFluor™555	556	569	TRITC	46003
鏈霉親和素-Xtra™iFluor™594	587	603	德州紅	46005
鏈霉親和素-Xtra™iFluor™647	654	669	Cy5	46007

 

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