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應用紀要:富集和脫鹽的超濾解決方案

瀏覽次數:1771 發布日期:2022-7-29  來源:賽多利斯
富集和脫鹽是對生物分子進行分析需要進行的前處理之一。這些生物分析方法包括對純化時收集到的組分進行組織培養實驗,洗脫峰進行SDS-PAGE電泳。以及對樣品進行結構和純度分析時進行的質譜分析、毛細管電泳、傅里葉紅外光譜分析等等。

與脫鹽柱僅能實現脫鹽不同,對檢測樣品進行超濾,用超純水進行緩沖液置換,可以快速實現脫鹽的同時也對樣品進行了濃縮,同時實現了脫去鹽分和提高濃度的目的。如果同時檢測的樣品很多,超濾的優勢就更加明顯了,看看這么多小兄弟齊上陣,效率杠杠的!不得不說,超濾真的是一個一舉三得的好方案。
 
讓我們一起來認識一下超濾家族的小兄弟Vivaspin 500Vivacon 500還有哪些超能力?
 
 
樣品量低?擔心回收率

Vivaspin 500
我采用的是超快流速的PES膜,有快速能力做保障,因此我只有單面膜,非特異性吸附降低一半。
 
 

Vivacon 500
我采用的是極低吸附的Hydrosart膜,而且是膜面積非常小的橫膜,最大程度降低非特異性吸附。
 
 
效率如何進一步提高?

Vivaspin 500
悄悄告訴你,由于我只有單面膜所以底部空間較大,離心后吸頭正好插入底部完全回收,不用反轉離心哦。
 
 
平行樣品間如何獲得
盡量一致的濃縮倍數?

Vivacon 500
我是平面膜盡量保持離心力一致即可;
 

Vivaspin 500
我是切向流單片膜,除了離心力外還要注意每一個小兄弟都保持刻度面朝上放置;如果使用的是市面上其它雙面膜的產品,盡量使兩個膜片側向相對,而不是上下相對。
 
 
如何避免超濾管上的
保護劑干擾檢測結果?
 
我們的超濾膜上有痕量的甘油和疊氮化鈉用來避免膜干燥。通常這些保護劑不會干擾檢測。但因為后續的檢測不同,如果有干擾可以用緩沖液和純凈水對超濾管進行預潤洗。如果仍對檢測有影響,還可以用0.1N的HCl進行預潤洗,去掉干擾峰。Vivaspin 500 有PCR grade的產品,進行核酸分離時如需要避免核酸的污染,可以采用。
 
 
1劍橋大學的科學家在進行胰島素A鏈肽段(MW 2.5kD)和降鈣素(MW 3,593 Da)研究時,采用Vivaspin 500 3kD的產品在13000rpm 離心對它們進行濃縮。盡管兩種蛋白的分子量很小,但回收率分別達到了98%和99%。 
 
 
 
 
我們超濾小兄弟有多種孔徑:

Vivaspin 500
(3kD,5kD,10kD,30kD,50kD,100kD,300kD,1000kD)

Vivacon 500
(2kD,10kD,30kD,50kD,125kD)

無論處理病毒、蛋白、核酸樣品均可大顯身手。
 
 
百聞不如一試,
歡迎感興趣的朋友申請樣品免費試用!
 

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*試用名額有限,先到先得
*本活動的最終解釋權歸賽多利斯中國所有

-參考文獻-
1.Alan R. Johnson, Christine Turner
Anatomy Department, University of Cambridge, Downing Street, Cambridge, CB2 3DY. UK
Lab filtration Application note 2001
發布者:德國賽多利斯集團
聯系電話:實驗室產品與服務事業部:400 920 9889 / 生物工藝解決方案事業部:400 680 1870
E-mail:info.cn@sartorius.com

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