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VisiSens™探測器在腎血管性高血壓小鼠模型中氧氣監測的應用

瀏覽次數:714 發布日期:2023-11-16  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

在這項研究中,我們使用了腎血管性高血壓的小鼠模型,稱為兩腎一夾模型(2K1C)。在該模型中,一條腎動脈收縮,最終導致循環血管緊張素II增加和血壓升高。VisiSens系統用于監測夾閉腎臟中的微血管灌注,并確保腎臟灌注減少但仍正常。使用VisiSens系統創建的氧氣圖像可以評估夾閉前后小鼠腎臟的灌注狀態。這樣就可以確定腎臟梗塞的動物,這些動物必須被排除在實驗之外。

一、材料與方法

 

選用4 ~ 5周齡體重約20 g的雄性C57BL/6 小鼠。小鼠用戊巴比妥鈉(50mg / kg)麻醉,通過吸入異氟醚維持。于大鼠左側腹部腎臟位置行縱向切口,鈍性分離暴露腎臟,分離出腎動脈,用不銹鋼U型夾(見圖1)環繞左腎主動脈,夾緊,造成左腎動脈狹窄,右腎不觸及,復位腎臟,檢查有無完全缺血,并用氧傳感器箔(SF-RPSu4)覆蓋。假手術組動物被用作對照。

為了固定VisiSens™探測器單元DU01,制作了一個支架,該支架首先應用于手術臺上(見圖2 A),隨后將其固定在手術顯微鏡旁邊(見圖2 B)。通過這種設置,我們能夠拍攝腎動脈夾閉前后腎臟微血管形成的氧氣圖像。

圖1:用于收縮腎動脈的不銹鋼U型夾(尺寸:3 x 2 x 1 mm ,帶有 2 mm 長的間隙),夾子開口的寬度為 0.127 毫米。

圖2:微血管灌注監測裝置:將氧傳感器箔放置在小鼠腎臟上,VisiSens™檢測器單元固定在傳感器箔上方的支架上,用于氧氣圖像記錄(A)。VisiSens™檢測器單元固定在手術顯微鏡(B)旁邊

 

二、小鼠腎臟的氧成像

 

使用VisiSens™系統,我們能夠拍攝處理過的小鼠腎臟的氧氣圖像。圖 3 中記錄的圖片顯示了夾閉和腎動脈收縮前的微血管灌注情況。將封堵器放置在動脈上后,可以檢測到灌注明顯減少,表現為腎組織中較低的氧濃度(圖4)。監測夾閉腎臟中的微血管灌注對于檢查血流是否未完全閉塞很重要。圖 5 顯示了完全閉塞的腎臟的氧氣圖像。在那里,腎臟組織顯示出極低的氧氣濃度,表明它不再正確灌注。這只動物必須被排除在實驗之外。夾緊4周后,兩腎一夾高血壓小鼠的血壓比假手術對照組高出約20 mmHg。

圖3:腎動脈結扎前拍攝的氧氣圖像;該圖像顯示了正確灌注的腎臟組織中的高氧含量(用黃色表示)。

圖4:放置封堵器后小鼠腎臟的氧圖像;可以觀察到組織中的氧氣水平略有降低。

圖5:小鼠腎臟的完全閉塞;組織不再提供氧氣,在氧氣圖像中清晰顯示。


三、結論

 

我們發現VisiSens™適用于體內分析實體器官(腎臟、肝臟、皮膚)的微循環,但是在不規則形狀的表面上使用傳感器箔時存在一些局限性。氧氣成像系統可以監測微循環和氧氣供應,并用它來檢查感興趣器官的狀況,從而可以決定是否繼續在相應的動物身上進行實驗。

實驗來源:

Zoltán Varga
Cardiovascular Research Group, Department of Biochemistry, University of Szeged, Hungary

 

圖片圖片

 

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