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GFS-3000光合-熒光儀入門流程

瀏覽次數:1660 發布日期:2024-2-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
GFS-3000光合-熒光儀是測量植物葉片,苔蘚等光合生物氣體交換的儀器。它的原理是紅外氣體分析法,它的核心部件是紅外氣體分析儀(Infrared Gas Analyzer, IRGA)。它測量的目標物是CO2和H2O,CO2和H2O是植物光合作用過程中與環境發生氣體交換的兩個主要成分,植物的蒸騰作用會從葉片向空氣中散失H2O,光合作用會從空氣中吸收CO2合成有機物。植物葉片與環境發生氣體交換的窗口是氣孔, H2O和CO2都需要經過氣孔離開或進入葉片。進入葉片的CO2要擴散到葉綠體才能參與光合作用暗反應。因此,光合儀的原理、功能和用途可以總結為一句話,即:光合儀是利用紅外氣體分析器測量流經葉片前后CO2和H2O的濃度變化,分析葉片與環境發生的氣體交換,用固定了多少CO2來表征光合作用的能力的儀器。光合儀可以獲得的常用參數有同化速率(A),蒸騰速率(E),氣孔導度(GH2O),胞間二氧化碳濃度(Ci)等


 
First Thing First
使用IRGA原理的儀器設備時,要想數據測得準,以下兩點要格外注意:預熱和標定
預熱:打開測量模式后,要先讓儀器工作一段時間,使分析器腔室達到恒定工作溫度。預熱完成前測量并記錄的CO2和H2O濃度會漂移。根據經驗,GFS-3000測量的CO2和H2O濃度可以在15分鐘后基本穩定,但是,如果您需要非常高的精度,建議預熱時間為1小時
標定:如果想要紅外分析器長久的維持高精度運轉,定期標定是非常關鍵的。所謂的標定是用已知濃度的純凈氣體來校驗分析器測量結果,如果測量結果與已知濃度的氣體不一致,說明分析器有漂移,需要通過標定程序將兩者設為一致。只有兩者一致才能保證分析器是正常的,測出來的數據是可信的。
標定分為Zero標定和Span標定,CO2和H2O的Zero標定可以分別用堿石灰和干燥劑將密閉氣路內CO2和H2O完全吸附來完成,使用者根據軟件中的流程提示自己即可操作。CO2和H2O的Span標定則需要已知濃度的氣罐和冷阱,只能由專業工程師來完成。什么時候需要標定呢?在Mode ZP模式下,dCO2ZP>2ppm時需標定CO2零點,dH2OZP>200ppm時需要標定H2O零點。對于紅外分析器的長期維護,建議Span標定的周期是不超過1年,GFS-3000光合儀自安裝調試后起可享受一次免費標定!


儀器連接
正確連接電源或電池,葉室與主機連接線,緩沖瓶,藥品管。
電源或電池連接不正確可能會導致電源無法接通,無法開機,還可能會導致分析器初始化失敗,機器無法通過自檢。
葉室與主機連接線有明確的方向,連接不正確可能導致無法檢測到測量頭,無法控制溫度,光照。葉室氣路的From和To與主機上的對應即可。
緩沖瓶可以保證Air in進氣穩定,縮短數據穩定的時間。
三個藥品管從左到右依次是干燥劑、加濕劑和CO2吸收劑。干燥劑和加濕劑藥品管僅在更換藥品或標定時拆卸,日常使用只需關注內部藥品的狀態,GFS-3000的原裝的干燥劑為橙色,吸水后會變透明,已經變透明的干燥劑需要盡快更換。加濕劑不變色,可以根據控濕時是否達到控制值來判斷時都需要要加水,加水只能加煮沸過的蒸餾水,實驗沒有加濕要求可忽略此管的維護。CO2吸收劑比較特殊,新鮮的為灰白色,吸附CO2會變為紫色,但是紫色會隨時間延長褪去。使用CO2吸收管時要注意,當實驗要求控制CO2濃度時,需要給GFS-3000加裝CO2鋼瓶,此時必須連接CO2Absorber藥品管。如果實驗沒有控制CO2濃度的需求,此時,要將CO2Absorber藥品管拆下,換上混合空管 3000-C/MV,如果在不控CO2的情況下安裝了CO2吸收管可能會導致進入葉室CO2為0,無法測量。相反,如果在需要控制CO2時未加裝CO2吸收管,同樣也無法實現控制功能。


測量頭選擇
打開系統后,進入Measure Mode前,首先要連接的測量頭類型。
點擊左邊上面選框可以選擇:標準測量頭,或3010-GWK-1或3010-DUAL聯用葉室。
點擊中間上面選框可以選擇:3056-FL熒光附件,或3050-F或Imaging-PAM熒光附件。
點擊右邊上面選框可以選擇:3040-L光源,或3041-L光源或RGBW光源。
點擊左邊下面選框可以選擇:光學氧氣傳感器。
下面中間和右邊選框為校準使用,無需關注。
通常選擇的是標準測量頭3010-S和配套光源,光源類型可根據光源上的標簽區分。
務必清楚機器上接的啥,再選!否則可能無法正確識別測量頭。


測量模式-預熱
所有連接妥當后進入測量模式,GFS-3000會自動執行一系列操作,包括:
1、Initialization of Analyzer, please wait(max 100 s)初始化
2、Getting parameters of analyzer獲取分析器參數
3、Searching Measure Head識別測量頭
4、Read Settings of Measure Head讀取測量頭設置
5、Peltier test……….檢測測量頭控溫模塊
6、Peltier Test ok控溫模塊測試通過
7-1、然后進入測量模式。
7-2、如果連接了熒光附件,如3056-FL,還會顯示Searching for Fluorescence module查找熒光模塊,然后再進入測量模式。
上述自動操作的過程,使用者無需做任何操作,只需要留意界面動態,特別是Menu右側的信息提示框,如果出現黃色提示信息,請嘗試讀懂它的意思,如果無法做出判斷,或出現數字代碼,請及時聯系我們的技術工程師

測量模式-創建文件
請牢記,永遠把數據存儲的設置放在第一位。
點擊軟件中的Filename,創建保存數據的文件,后續測量的數據會自動存儲到這個文件內。創建文件名后,還需要選擇測量面積(A)或重量(W),葉片通常選面積,測量苔蘚或小動物呼吸時可選重量。面積設置非常重要,因為面積參與光合速率的計算。葉室面積可根據安裝的適配片確定,常用的有三種,標準的為2*4,8 cm2;狹長的為1*4,4 cm2;圓形的為3 cm2,其他的特殊類型可根據實際情況設置。葉室面積也可以通過界面中的Area進行設置。


 
測量模式-設置氣流
點擊軟件界面中的Flow,可設置流速,標準設置為750 μmol/s,此流速為泵入分析器的氣體流速。Mode MP模式下,750 μmol/s的流速等同于兩個浮子流量計的高度,即參比分析器(Analyser Ref)和樣品分析器(Analyser Sam)均為750 μmol/s。在Mode ZP模式下,泵入分析器的氣體流速為設置值的一半,浮子流量計小球高度會降低一半。


 
點擊軟件界面中的Impeller,可以設置葉室風扇的速度,標準設置為7,該數值為風扇轉速的檔位,風扇的作用是混勻葉室內局部小環境的氣體。對于光合作用過程中氣體交換微弱的植物,如林下的陰生植物,轉速可以設置為5或者更小的數值

測量模式-控制光溫水氣
GFS-3000可以精準控制各種環境因子(光強、溫度、H2O 、CO2)。
5種控光模式可選:控制葉片正面光強,控制葉片背面光強,控制環境光強,葉片正面跟隨環境光強,葉片背面跟隨環境光強。常用的是控制葉片正面光強
4種控溫模式可選:跟隨環境溫度,控制葉室溫度,控制葉片溫度,以恒定差值跟隨環境溫度。最常用的是控制葉室溫度。先進的PeltierTM控溫技術,控溫性能佳,葉室可降溫10 ℃,增溫至50 ℃。
3種控濕模式可選:以ppm為單位控制H2O的絕對濃度,以rh(%)控制相對濕度或執行完全干燥的測量。如果想控制相對濕度,軟件會提示必須先控制溫度。如果要控制到較高的濕度,則溫度不可以控制得太低,否則會產生結露。此時需要留意軟件的提示信息欄,及時調整控制選項。小編本人更喜歡控制H2O的絕對濃度,在輸入控制值后軟件會提示露點溫度,此時只需要保證控溫高于露點溫度即可
控制CO2濃度:直接輸入設置值即可。創新性的CO2緩釋設計,可以在CO2不足時,在不中斷測量的情況下隨時加裝CO2小鋼瓶。注入系統密閉性佳,可有效節省耗材。


測量模式-分析器調零
分析器調零和前面講的分析器標定是兩個概念。如果把紅外氣體分析器比作天平,標定即為用標準砝碼校準天平,調零則相當于稱量前去皮。無論是分析器調零還是分析器標定都必須在機器充分預熱后進行。GFS-3000的分析器調零分兩步:Mode ZP調零和Mode MP調零Mode ZP 模式調零消除的是參比分析器(Analyser Ref)和樣品分析器(Analyser Sam)之間的差值,需要在dCO2和dH2O曲線穩定后計數,此時存的是ZPirga;Mode MP模式調零消除的是參比分析器(Analyser Ref)和樣品分析器(Analyser Sam)+葉室氣路(Cuvette)之間的差值,同樣需要在dCO2和dH2O曲線穩定后計數,此時存的是ZPcuv。調零結束后即可開始測量。


測量模式-采集數據
推開葉室,夾上待測葉片,關閉葉室,開始測量。此時需要確認的細節有以下幾點:葉片要占滿葉室;Tleaf溫度傳感器要接觸到葉片;葉室要密閉(通過葉室開關上的旋鈕可調節葉室關閉的松緊程度),兩個流量計高度一致。夾上葉片后可到Value窗口觀察同化速率A值等待穩定后,點擊屏幕下方常用命令區第二個按鈕 Store MP,存儲測量數據。然后更換下一個葉片繼續測量。
進階操作:通過點擊 Value選項卡三次,切換至Val Steady界面。在此界面下,GFS-3000會根據預設的穩定判定標準判斷測量是否達到穩態。等A值下面出現=號時,點擊屏幕下方常用命令區第二個按鈕Store MP,存儲數據。如果Val Steady界面所有數據都穩定了,Val Steady會變成紅色,此時可以果斷點擊Store MP。預設的穩定判斷標準可以通過主菜單-高級設置-穩定測量設置進行修改,修改后的標準記得保存。后續會根據新加載的標準進行判定測量是否已經達到穩定。所有保存的數據會顯示在Report界面并寫入最初創建的文件。


數據導出
最新的GFS-3000可以直接連接U盤,將主機平板電腦上的文件直接復制到U盤即可導出數據。

關機
測量結束后干燥氣路對分析器的長期穩定運行至關重要!
測量結束后,氣路內部可不免得會殘留水蒸氣。為防止在測量后存放過程中因溫度過低而導致的內部結露,GFS-3000關機時必須選擇通干燥氣體。GFS-3000具有關機過程的自動干燥功能,可排出儀器內殘余濕氣。執行關機操作時,葉室應該是閉合的,保證整個測量系統處于密閉狀態。等自動干燥結束后,軟件會自動關閉,此時需要將葉室打開存放,此操作可避免葉室的密封海綿因長期處在壓縮狀態下失去彈性。
如果只是短暫的休息,可將GFS-3000置于Standby,系統會在干燥氣體沖刷分析器后關閉顯示器,進入待機模式。休息結束后,只需再次點擊屏幕即可將GFS-3000從待機模式喚醒,然后點擊菜單欄的On/Off,選擇Measure Mode On快速進入測量模式,無需預熱,但是建議再次調零后開始測量。


步步為“贏”
測量前認真閱讀該文章對理解氣體交換測量原理和GFS-3000測量規范非常有幫助。
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