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實驗數據說話:不同型號超聲波DNA打斷儀的實際效果對比

瀏覽次數:366 發布日期:2025-2-17  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
實驗目的:將全基因組DNA樣品進行200-500bp區間的均一性片段化處理。

實驗儀器及材料:
1.實驗儀器:本次實驗選用三款非接觸打斷儀器如下:小美超聲-高通量聲波基因組剪切儀、bioruptor-非接觸式超聲破碎儀、小美超聲-聚能式超聲波DNA打斷儀。
 
2.實驗材料:核酸濃度為160 ng/μL的全基因組DNA溶液。

實驗步驟:  
1.提前15分鐘將三款儀器的冷水機啟動,設置溫度為4℃。
2.將每個愛思進品牌的1.5 mL EP管加入100 μL 濃度為160 ng/μL的全基因組DNA溶液。
3.將2管裝好樣品的1.5 mL EP 管分別放入三款儀器的適配器當中,其他空余的孔位由加同樣體積水的1.5 mL EP 管補齊。
4.程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長15分鐘和20分鐘,二個梯度對比。
5.程序結束后,取出樣品使用毛細管電泳進行基因組片段化檢測。

實驗結果:
1.小美超聲-高通量聲波基因組剪切儀
①程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長15分鐘
平均片段大。310.0 bp

 

 
片段范圍 bp 占比 %
25-100 4
100-200 21.3
200-500 64.7
500-904 10

②程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔10s,總時長20分鐘 
平均片段大。300.1 bp

 
 
片段范圍 bp 占比 %
25-100 4.2
100-200 22.7
200-500 64.3
500-904 8.8

2.bioruptor-非接觸式超聲破碎儀
①程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長15分鐘
平均片段大。432.9 bp

 

 
片段范圍 bp 占比 %
24-100 1.4
100-200 7.8
200-500 58.3
500-891 32.5

②程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長20分鐘
平均片段大小:405.8 bp

 
 
 
片段范圍 bp 占比 %
24-100 1.5
100-200 9.5
200-500 63.2
500-904 25.8

3.小美超聲-聚能式超聲波DNA打斷儀
①程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長15分鐘
平均片段大。365.5 bp

 

 
片段范圍 bp 占比 %
24-100 2.1
100-200 13.6
200-500 65.4
500-904 18.9

②程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長20分鐘
平均片段大。388.1 bp

 

 
片段范圍 bp 占比 %
24-100 1.9
100-200 12.3
200-500 62.2
500-904 23.6

4.三款儀器實驗結果匯總
 
  總時長15分鐘
200-500 bp區間占比
總時長20分鐘
200-500 bp區間占比
峰圖趨勢
小美超聲-高通量聲波基因組剪切儀 64.7% 64.3% 平緩
bioruptor-非接觸式超聲破碎儀 58.3% 63.2% 陡坡
小美超聲-聚能式超聲波DNA打斷儀 65.4% 62.2% 陡坡

注:當基因組片段在200-500 bp區間占比越高,峰圖越平緩狀時,說明基因組片段的均一性更好,反之亦然。

在樣品、程序設定等條件相同的情況下,bioruptor的非接觸式超聲破碎儀和小美超聲的聚能式超聲波DNA打斷儀在200-500 bp區間占比分別達到58.3%和65.4%,且二者峰圖呈陡坡狀,表明基因組片段化均一性差。

小美超聲的高通量聲波基因組剪切儀在200-500 bp區間占比達到64.7%,峰圖呈平緩狀,表明基因組片段均一性更好。
來源:上海凈信實業發展有限公司
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