還在為Western blot轉膜效率頭疼?不同樣本、不同蛋白總翻車?一篇干貨帶你解鎖三大轉膜技術的關鍵差異,實驗效率翻倍不是夢!
三大轉膜法"比武擂臺"
01 傳統濕轉法:經典中的"老司機"
☑️ 適用場景:>100kDa大分子量蛋白、膜蛋白
☑️ 核心優勢:低溫環境減少蛋白降解,均一性好
⚠️ 硬傷:耗時2小時+,緩沖液用量大(費錢警告!)
💡 操作口訣:冰浴降溫要徹底,濾紙浸潤排氣泡
02 半干轉法:省時省料的"效率派"
☑️ 適用場景:10-100kDa常規蛋白
☑️ 核心優勢:15-60分鐘閃電戰,緩沖液僅需5-10ml
⚠️ 硬傷:易發熱需嚴格控壓,大分子易截留
💡 操作秘籍:濾紙裁剪精確到毫米,電壓梯度要優化
03 快速濕轉法:新晉"六邊形戰士"
☑️ 適用場景:10-200kDa蛋白都適用
☑️ 核心優勢:20分鐘極速轉膜
⚠️ 硬傷:暫無
💡 黑科技加持:自帶制冷卻系統+增強型電極
艾普拜生物CycleBlot快速濕轉儀
20分鐘快速濕轉,完美融合傳統濕轉和半干轉的優勢,既擁有濕轉法的穩定,又享受半干轉的速度,一招解決轉印痛點!
進階實驗錦囊
通用避坑指南
- 甲醇激活PVDF膜別超15秒!
- 見氣泡如見仇敵——玻璃棒滾壓大法
- 轉膜后立即標記膜角落(防結果混淆)
特殊樣本處理
- 磷酸化蛋白:全程4℃操作+添加磷酸酶抑制劑
- 膜蛋白:緩沖液加0.1% SDS助攻
艾普拜生物WB產品線一站式解決方案