利用轉輪研究動物的晝夜節律主要分為如下幾個部分:
一、實驗準備
選擇合適的動物:通常選用小鼠、大鼠等模式動物,它們具有明顯的晝夜活動節律,且易于在實驗室環境中飼養和觀察。
準備轉輪裝置:確保轉輪大小適合實驗動物,轉動靈活,且配備精確的記錄系統,能夠準確記錄轉輪的轉動次數、時間等數據。將轉輪安裝在實驗動物的飼養籠內,保證動物能夠自由進出轉輪。
設置實驗環境:將飼養籠放置在光線、溫度、濕度等環境條件可控的實驗室內。設定固定的光照周期,如 12 小時光照、12 消時黑暗,模擬自然晝夜環境,并保持溫度在 22 - 25℃,濕度在 40% - 60%,以提供穩定的實驗條件。
二、實驗過程
適應期:在正式實驗開始前,讓動物在轉輪環境中適應 3 - 7 天,使它們熟悉轉輪和周圍環境,減少應激反應對實驗結果的影響。在此期間,正常提供食物和水,讓動物自由活動。
數據采集期:適應期結束后,開始正式記錄數據。持續記錄動物在轉輪中的活動情況,一般以天為單位,記錄多個連續的晝夜周期。記錄內容包括轉輪每次轉動的時間、轉動次數等信息,通過這些數據可以分析動物在不同時間段的活動強度和頻率。
改變實驗條件(可選):在完成基礎數據采集后,可以根據研究目的改變一些實驗條件,如調整光照時間、改變溫度等,觀察動物在轉輪中的活動節律如何隨環境變化而改變。例如,將光照時間延長或縮短,觀察動物的活動高峰是否會相應地提前或推遲。
三、數據分析
繪制活動曲線:根據記錄的數據,以時間為橫軸,轉輪轉動次數或活動時間為縱軸,繪制動物的活動曲線。通過活動曲線可以直觀地觀察到動物在晝夜不同時間段的活動情況,確定其活動高峰和低谷出現的時間。
計算節律參數:利用專門的數據分析軟件或統計方法,計算動物活動的節律參數,如晝夜活動周期、活動振幅(即活動高峰與低谷之間的差值)、活動相位(即活動高峰相對于光照 - 黑暗周期的時間位置)等。這些參數可以定量地描述動物的晝夜節律特征。
比較不同組別的差異:如果設置了不同的實驗條件或有多個實驗組,通過統計學分析方法(如方差分析、t 檢驗等)比較各組之間節律參數的差異,以確定不同因素對動物晝夜節律的影響。例如,比較正常光照組和光照改變組動物的活動周期、活動相位等參數,判斷光照變化是否對動物的晝夜節律產生了顯著影響。