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m6A-mRNA&lncRNA表觀轉(zhuǎn)錄組芯片

m6A-mRNA&lncRNA表觀轉(zhuǎn)錄組芯片


m6A-mRNA&lncRNA Epitranscriptomic Microarray
Arraystar m6A-mRNA&lncRNA表觀轉(zhuǎn)錄組芯片,可定量檢測mRNA&lncRNA中m6A的表觀轉(zhuǎn)錄修飾水平。
服務(wù)類別:芯片與生物信息學(xué)總訪問:1289
最后更新:2018-11-26半年訪問:34
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  • 服務(wù)介紹
  • 公司簡介

      Arraystar m6A-mRNA&lncRNA表觀轉(zhuǎn)錄組芯片,可定量檢測mRNA&lncRNA中m6A的表觀轉(zhuǎn)錄修飾水平。

芯片優(yōu)勢
與MeRIP-seq相比,Arraystar表觀轉(zhuǎn)錄組芯片有其獨(dú)特的優(yōu)勢:
• 可同時(shí)檢測何種轉(zhuǎn)錄本攜帶修飾,以及不同條件下的修飾差異,更重要的是,還可以檢測每一種轉(zhuǎn)錄本的修飾比例
• 全面覆蓋了編碼基因和非編碼基因,甚至用MeRIP-seq方法很難檢測的lncRNA也可用芯片檢測
• 不需要去除rRNA,比MeRIP-seq更簡單便捷
• 樣本需求量少,總RNA量低至1ug
• 適用于多種樣本,比如降解的FFPE樣本,血清/血漿/全血樣本

Arraystar mRNA&lncRNA表觀轉(zhuǎn)錄組芯片產(chǎn)品列表

服務(wù) 芯片 表觀修飾 規(guī)格 描述
Human mRNA&lncRNA 表觀轉(zhuǎn)錄組芯片技術(shù)服務(wù) Human mRNA&lncRNA 表觀轉(zhuǎn)錄組芯片 m6A 8×60K 44,122 mRNAs; 12,496 lncRNAs; 3,813 Mid-size ncRNAs
Mouse mRNA&lncRNA 表觀轉(zhuǎn)錄組芯片技術(shù)服務(wù) Mouse mRNA&lncRNA 表觀轉(zhuǎn)錄組芯片 m6A 8×60K 48,161 mRNAs; 8,393 lncRNAs; 4,087 Mid-size ncRNAs
Rat mRNA&lncRNA 表觀轉(zhuǎn)錄組芯片技術(shù)服務(wù) Rat mRNA&lncRNA 表觀轉(zhuǎn)錄組芯片 m6A 4*44k 27,770 mRNAs; 10,582 lncRNAs; 2,505 Mid-size ncRNA

芯片特點(diǎn)

芯片可定量每一種轉(zhuǎn)錄本的修飾百分比
      同一種RNA轉(zhuǎn)錄本的修飾亞群和非修飾亞群,由于其結(jié)構(gòu)和結(jié)合蛋白的不同,會(huì)導(dǎo)致不同的命運(yùn)(圖1)。重要的是,轉(zhuǎn)錄本的修飾比例與它們的功能高度相關(guān)。然而目前的修飾檢測方法,比如MeRIP-seq(m6A-seq),可以確定修飾的位置,卻無法對一個(gè)特定RNA轉(zhuǎn)錄本修飾和非修飾部分的相對含量進(jìn)行定量。Arraystar表觀轉(zhuǎn)錄組芯片能夠在同一個(gè)芯片中通過雙熒光通道的方法檢測每個(gè)轉(zhuǎn)錄本修飾亞群和非修飾亞群的百分比(圖 2),同時(shí)對何種轉(zhuǎn)錄本發(fā)生修飾和不同條件下轉(zhuǎn)錄本的修飾差異進(jìn)行鑒定。

圖 1.同一種RNA轉(zhuǎn)錄本,隨著其修飾的化學(xué)計(jì)量數(shù)發(fā)生變化,其功能也隨之改變。在某一種細(xì)胞條件下,攜帶修飾的“RNA 轉(zhuǎn)錄本a”所占百分比可能非常低(比如,細(xì)胞狀態(tài)1),但在另外一種條件下豐度變的很高(比如,細(xì)胞狀態(tài)2)。通過引起RNA結(jié)構(gòu)改變,或招募修飾閱讀蛋白, “轉(zhuǎn)錄本a”的命運(yùn)發(fā)生變化,比如從蛋白翻譯轉(zhuǎn)變?yōu)镽NA降解。


圖 2.Arraystar表觀轉(zhuǎn)錄組芯片可以在同一張芯片上使用Cy5檢測免疫共沉淀的修飾RNA,用Cy3檢測上清中的非修飾RNA,從而檢測每一個(gè)轉(zhuǎn)錄本中修飾和非修飾的百分比。選擇性剪切產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄本異構(gòu)體可以被轉(zhuǎn)錄本特異性探針?biāo)鶛z測。

覆蓋編碼基因和非編碼基因的表觀轉(zhuǎn)錄組
•Arraystat mRNA&lncRNA Epitranscriptomic Microarrays
適用于mRNA, lncRNA, pre-miRNA, pri-miRNA, snoRNA, 和 snRNA
•Arraystar circRNA Epitranscriptomic Microarray
適用于環(huán)狀RNA,芯片收集了高可信度的環(huán)狀RNA(在≥2個(gè)實(shí)驗(yàn)組和≥4個(gè)樣本中有表達(dá))
•對MeRIP-seq很難檢測的RNAs(比如lncRNA和circRNA),也具有高靈敏度和準(zhǔn)確度
轉(zhuǎn)錄本特異性的RNA修飾檢測
      選擇性剪切產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄本異構(gòu)體具有組織特異性和不同的生物功能。例如,TRIM9短的異構(gòu)體(NM_052978),而非長的異構(gòu)體(NM_015163),能夠促進(jìn)DNA和RNA病毒引起的I型干擾素的表達(dá)。轉(zhuǎn)錄本異構(gòu)體的修飾百分比發(fā)生改變,常與生物功能和疾病相關(guān)。

      Arraystar表觀轉(zhuǎn)錄組芯片,使用外顯子和跨剪接位點(diǎn)特異性探針,確保了每個(gè)轉(zhuǎn)錄本異構(gòu)體修飾水平檢測的可信度與精確性,提供了更深層次的表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)信息(圖 3)。

圖 3. Arraystar表觀轉(zhuǎn)錄組芯片使用轉(zhuǎn)錄本特異性探針A和探針B,分別檢測TRIM9的長轉(zhuǎn)錄本(NM_015163)和短轉(zhuǎn)錄本(NM_052978)攜帶的RNA修飾。

樣本需求量少
      
目前MeRIP-seq技術(shù)需要≥120g的總RNA起始量,所需樣本量多,限制了MeRIP-seq的適用性。相比于MeRIP-seq,Arraystar表觀轉(zhuǎn)錄組芯片只需1ug 總RNA的起始量,所需RNA的量大大減少(表 1),為珍貴樣本和來源有限的樣本研究RNA修飾提供了機(jī)會(huì)。

  表觀轉(zhuǎn)錄組芯片 MeRIP Seq
RNA起始量   
≥1ug total RNA

≥120ug total RNA
分離mRNA或去除rRNA
不需要

需要
RNA是否完整
不需要    

需要

數(shù)據(jù)庫

Human mRNA&lncRNA Epitranscriptomic microarray

探針總數(shù) 60,613
探針長度 60 nt
探針位點(diǎn) mRNA & lncRNA: 特異性外顯子和選擇性剪切位點(diǎn)
Mid-size ncRNAs: ncRNA的獨(dú)特序列區(qū)域
探針特異性 轉(zhuǎn)錄本特異性
標(biāo)記方法 全長標(biāo)記cRNAs,無3’偏好性,豐度很低的降解RNA也可標(biāo)記
蛋白編碼mRNAs 44,122
LncRNAs 12,496
Mid-size ncRNAs 1,366 (pre-miRNAs), 1,642 (pri-miRNAs), 19 (snRNAs), 786 (snoRNAs)
mRNA 數(shù)據(jù)庫 Refseq, UCSC, GENECODE, FANTOM5 CAT [2-6]
lncRNA 數(shù)據(jù)庫 Arraystar LncRNA 收集方式:
收錄所有已更新至2018年的數(shù)據(jù)庫和已發(fā)表文獻(xiàn)中的lncRNAs, 每一個(gè)lncRNA基因優(yōu)先挑選“Canonical” 或 “longest” 轉(zhuǎn)錄本
外部數(shù)據(jù)庫 (更新至2018):
Refseq, UCSC, GENCODE, FANTOM5 CAT, LncRNAdb, RNAdb, NRED [2-8]
參考文獻(xiàn):
收錄至2018年所有文獻(xiàn)中的lncRNA [9-45]
Mid-size ncRNA 數(shù)據(jù)庫 GENECODE, miRBase [1-2]
芯片規(guī)格 8 × 60 K

>>參考文獻(xiàn)列表

Mouse mRNA&lncRNA Epitranscriptomic microarray

探針總數(shù) 60,773
探針長度 60 nt
探針位點(diǎn) mRNA & lncRNA: 特異性外顯子和選擇性剪切位點(diǎn)
Mid-size ncRNAs: ncRNA的獨(dú)特序列區(qū)域
探針特異性 轉(zhuǎn)錄本特異性
標(biāo)記方法 全長標(biāo)記cRNAs,無3’偏好性,豐度很低的降解RNA也可標(biāo)記
蛋白編碼mRNAs 48,161
LncRNAs 8,393
Mid-size ncRNAs 701 (pre-miRNAs), 957 (pri-miRNAs), 1229 (snRNAs), 1,200 (snoRNAs)
mRNA 數(shù)據(jù)庫 Refseq, UCSC, GENECODE [2-3]

LncRNA 數(shù)據(jù)庫
 
Arraystar LncRNA 收集方式:
收錄所有已更新至2018年的數(shù)據(jù)庫和已發(fā)表文獻(xiàn)中的lncRNAs, 每一個(gè)lncRNA基因優(yōu)先挑選“Canonical” 或 “longest” 轉(zhuǎn)錄本
外部數(shù)據(jù)庫 (更新至2018):
Refseq, UCSC, GENCODE, GenBank, lncRNAdb, NRED [2-7]
參考文獻(xiàn)s:
lincRNA分類[8-11], T-UCRs [12], 進(jìn)化保守 LncRNAs [13], 收錄至2018年所有文獻(xiàn)中l(wèi)ncRNA [14-22]
Mid-size ncRNA 數(shù)據(jù)庫 GENECODE, miRBase [1-2]
芯片規(guī)格 8 × 60 K

>>參考文獻(xiàn)列表

Rat mRNA&lncRNA Epitranscriptomic microarray

探針總數(shù) 40,991
探針長度 60nt
探針位點(diǎn) mRNA & lncRNA: 特異性外顯子和選擇性剪切位點(diǎn)
Mid-size ncRNAs: ncRNA的獨(dú)特序列區(qū)域
探針特異性 轉(zhuǎn)錄本特異性
標(biāo)記方法 全長標(biāo)記cRNAs,無3’偏好性,豐度很低的降解RNA也可標(biāo)記
蛋白編碼mRNAs 27,770
LncRNAs 10,582
Mid-size ncRNAs 432 (pre-miRNAs), 449 (pri-miRNAs), 155 (snRNAs), 1,469 (snoRNAs)
mRNA 數(shù)據(jù)庫 Refseq, Ensembl 92[1, 5]
LncRNA 數(shù)據(jù)庫 Arraystar LncRNA 收集方式:
收錄所有已更新至2018年的數(shù)據(jù)庫和已發(fā)表文獻(xiàn)中的lncRNAs, 每一個(gè)lncRNA基因優(yōu)先挑選“Canonical” 或 “longest” 轉(zhuǎn)錄本
正在更新的數(shù)據(jù)庫:
Ensembl 92 [1] , Refseq [5]
參考文獻(xiàn):
T-UCRs [6-9]
Mid-size ncRNA來源數(shù)據(jù)庫 GENECODE, miRBase, GtRNADb [2-3]
芯片規(guī)格 4 × 44K

>>參考文獻(xiàn)列表

實(shí)驗(yàn)流程

      Arraystar表觀轉(zhuǎn)錄組芯片提供完整的服務(wù),從樣本準(zhǔn)備,MeRIP,cRNA標(biāo)記,芯片實(shí)驗(yàn)到注釋和數(shù)據(jù)分析。嚴(yán)格的質(zhì)控步驟保證數(shù)據(jù)質(zhì)量和有效性。交給我們您的樣品,我們將做到最好。
m6A-mRNA&lncRNA Epitranscriptomic Microarray實(shí)驗(yàn)流程:

圖 4. m6A-mRNA&lncRNA Epitranscriptomic 芯片實(shí)驗(yàn)流程

• 客戶提供樣本(具體見樣本指南)
• RNA質(zhì)量檢測
• m6A-RIP
• cRNA合成和雙色熒光標(biāo)記(cy5標(biāo)記IP-RNA,cy3標(biāo)記上清RNA)
• 芯片雜交,洗脫和掃描
• 數(shù)據(jù)采集,數(shù)據(jù)注釋,數(shù)據(jù)分析和總結(jié)

 結(jié)果展示

      Arraystar在芯片表達(dá)檢測,數(shù)據(jù)分析和結(jié)果注釋方面有著專業(yè)而深入的知識與經(jīng)驗(yàn)。為客戶提供豐富而詳細(xì)的表觀轉(zhuǎn)錄組生物信息學(xué)數(shù)據(jù)分析結(jié)果。
差異m6A甲基化轉(zhuǎn)錄本(mRNA,lncRNA和mid-size ncRNA):

差異m6A甲基化mRNA聚類分析:

差異m6A甲基化mRNA GO富集分析:

差異m6A甲基化mRNA pathway分析:

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