同位素標記相對和絕對定量(iTRAQ)技術是最新開發的蛋白質組學技術,具有定量好、重復性高等優點,可對多達八種不同樣本進行分析,詳情請參看公司網站:http://
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在以往蛋白組學研究過程中先進行二維(2D)凝較電泳,切取蛋白點,再用質譜方法鑒定蛋白點中的蛋白質。這種方法既不是非常敏感,也不是非常精確。僅僅知道蛋白質的身份并不足以對蛋白質給出最終定論,因為蛋白質的濃度對于實現其在細胞中的功能來說極其重要,一種特殊蛋白質在濃度上的變化,就能預示細胞的突變過程。因此對蛋白質的相對和絕對濃度進行測量,是很重要的事情。iTRAQ技術可以對任何類型的蛋白質進行鑒定,包括高分子量蛋白質,酸性蛋白質和堿性蛋白質,而2D凝膠電泳對這些蛋白質卻束手無策。而且,2D凝膠電泳無法對膜蛋白那樣的不溶性蛋白質進行分析,但是iTRAQ標記系統和質譜法聯合使用可解決這些問題。
iTRAQ的操作程序一般如下:將蛋白質裂解為肽段,然后用iTRAQ試劑進行差異標記,再將標記的樣本相混合,這樣就可以對其進行比較。與樣本結合后,通常用用2D液相色譜串聯質譜進行后續的分析。在質譜分析鑒定特殊肽離子片斷結構的基礎上,采用美國應用生物系統公司的軟件包MASCOT和Protein Pilot對每一個肽段進行鑒定。
同時本公司還可以提供雙向電泳(2-DE)、熒光差異凝膠雙向電泳(DIGE)、蛋白質肽指紋圖譜鑒定(PMF)、串聯質譜鑒定(MALDI-TOF/TOF)、ESI源LC-MS/MS、Shotgun混合蛋白鑒定、蛋白質De-novo測序、蛋白質磷酸化和二硫鍵位點分析、蛋白質精確分子量測定、western-blot、免疫組化、病理學檢測、熒光定量PCR、生物信息學分析等服務。
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