PCR方法在人類及動植物疾病基因診斷、食品分析和環境監測等領域發揮著舉足輕重的作用，其靈敏度高、特異性好，是目前最精準的基因診斷方法。然而PCR方法操作起來較復雜，對儀器和人員要求比較高，不適合基層或現場快速診斷，因此在國內的推廣速度并不是很快。

2000年日本學者Notomi在Nucleic Acids Res雜志上公開了一種新的基因診斷技術，即 LAMP (Loop-mediated isothermal amplification),中文名為“環介導等溫擴增反應”，受到了世衛組織WHO、各國學者和相關政府部門的關注，短短幾年，該技術已成功地應用于SARS、禽流感、HIV等疾病的檢測中，在這次甲型H1N1流感事件中，日本榮研化學公司接受WHO的邀請進行H1N1 LAMP試劑盒的研制。通過榮研公司近十年的推廣，LAMP技術已廣泛應用于日本國內各種病毒、細菌、寄生蟲等引起的疾病檢測、食品化妝品安全檢查及進出口快速診斷中，并得到了歐美國家的認同。LAMP方法的優勢除了高特異性、高靈敏度外，操作十分簡單，對儀器設備要求低，一臺水浴鍋或恒溫箱就能實現反應，結果的檢測也很簡單，不需要像PCR那樣進行凝膠電泳，LAMP反應的結果通過肉眼觀察白色渾濁或綠色熒光的生成來判斷，簡便快捷，適合基層快速診斷。

可以預見，在未來的基因診斷領域，LAMP方法將占據大壁江山。
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榮研公司在其網站上提供免費的LAMP引物設計軟件，一次LAMP反應只需要30～60min就能完成，因此針對特定病原的LAMP診斷試劑盒研發周期較其他的基因診斷方法如PCR、熒光定量PCR等短。配套使用榮研公司提供的LAMP 反應液和實時渾濁儀將大大提高研發效率。

LAMP方法優點：靈敏度高（比傳統的PCR方法高2～5個數量級）；反應時間短（30～60min就能完成反應）；臨床使用不需要特殊的儀器（試劑盒研發階段推薦用實時渾濁儀）；操作簡單（不論是DNA還是RNA，檢測步驟都是需將反應液、酶和模板混合于PCR管中，置于水浴鍋或恒溫箱中63℃左右保溫30～60min，肉眼觀察結果）。

LAMP方法缺點：靈敏度高，一旦開蓋容易形成氣溶膠污染，加上目前國內大多數實驗室不能嚴格分區，假陽性問題比較嚴重，因此我們強烈推薦在進行試劑盒的研發過程中采用實時渾濁儀，不要把反應后的PCR管打開；引物設計要求比較高，有些疾病的基因可能不適合LAMP方法。

 

目前國內基因診斷常采用PCR方法，涉及到PCR儀，該儀器價格國產和進口價格不一，便宜的2～3萬也能買到，貴的20多萬。條件比較好的實驗室和國家機構也有嘗試熒光定量 PCR方法的，該方法技術含量高，必須使用熒光定量PCR儀，價格在20～70萬不等。

LAMP產品在臨床診斷中是不需要特殊儀器的，但臨床使用的成品試劑盒有賴于和國內擁有毒株的老師合作開發針對中國國情的疾病LAMP引物，在研發過程中由于涉及引物的選擇，引物濃度的調整，及反應溫度和時間的優化，需要用一種量化的方式去幫助研究者分析選擇數據，因此我們推薦用榮研公司的專利產品LA320C實時渾濁儀。

 

本產品操作方面的便捷性

LAMP方法較其他基因診斷方法，其最大的優勢就在于操作的簡便性及對儀器設備和人員要求低。LAMP操作步驟少，只需按照說明書要求將反應液、酶、引物和模板按照規定的量加入PCR管中，置于水浴鍋或恒溫箱反應30～60min，通過肉眼觀察反應管是否變為白色渾濁就能判斷結果。

 

在日本國內，LAMP診斷試劑盒幾乎已經取代了傳統的PCR方法，甚至在每個養雞場都配有相關的LAMP檢測試劑盒。OIE的官方網站上對于很多疾病的檢測方法中，LAMP陸續成為推薦方法。WHO預測，到2015年，在疾病的臨床診斷上，LAMP方法將取代目前所用的PCR方法。

 

市場推廣前期：根據目的不同，主要分為兩類。一是與公司合作開發試劑盒的實驗室，如CDC、出入境、國家參考實驗室、各高校科研院所及醫院擁有豐富毒株資源的實驗室。二是廣大科研工作者，由于LAMP方法剛進入中國不久，相關研究還很少，因此給學者們發表高水平文章提供了一個很好的機會和平臺。