摘要: 目的 研究鹽附子(SAC)對小鼠神經系統的急性毒性作用。方法 采用小鼠自發活動、爬桿、Morris水迷宮試驗,分別設SAC生藥7. 68、3. 84、1. 92g·kg^-1劑量組, ig給藥,同時設陰性對照和陽性對照組。單次給藥后15、60min用自發活動儀測定小鼠在10min內自發活動的次數;單次給藥30min后將小鼠放在爬桿架的玻璃棒上,記錄小鼠爬桿時間;連續給藥4d,末次給藥后30min進行水迷宮試驗,以小鼠找到隱藏平臺的時間為逃避潛伏期。結果 SAC高、中、低劑量組的小鼠自發活動次數、爬桿時間、逃避潛伏期與對照組相應指標相比,差異無統計學意義(P>0. 05)。結論 SAC濃度為7. 68、3. 84、1. 92g·kg^-1時,未觀察到其對小鼠神經系統的急性毒性作用。

 

關鍵詞:鹽附子; 自發活動次數; 爬桿時間; 逃避潛伏期; 神經毒性

 

附子Aconitumcarmichaeli為毛莨科植物烏頭子根的加工品,因其附生烏頭得名。附子的毒性成份為烏頭堿,可溶于水與乙醇,毒性極大,人口服0. 2mg即可產生中毒癥狀,其結晶2～4mg即可致死。鹽附子是泥附子經丹巴液鹽浸、曬晾炮制加工而成,是臨床上常用附子的炮制品。為其臨床的安全用藥提供依據,特選用小鼠自發活動試驗、爬桿試驗、Morris水迷宮試驗,研究了鹽附子的急性神經毒性。

 

1 實驗部分

111 試藥、儀器與動物

鹽附子(SAC，生藥1.09 g·ml^-1)為深褐色液體,由泥附子經鹽浸炮制加工而成；地西泮注射液(天津金耀氨基酸有限公司，5mg·ml^-1)；氫溴酸東莨菪堿注射液(上海禾豐制藥有限公司，0.3mg·ml^-1)。JXDH-Ⅰ自發活動儀(河北冀星試驗儀器公司)；Morris水迷宮系統(北京新天地科技有限公司);小鼠爬桿架(自制)。普通級健康成年昆明種小鼠[四川省實驗動物專委會養殖場,生產許可證號SCXK(川)2004-014]共150只，體重20至26g，♀♂兼用。小鼠飼養于中心的普通級小動物房，每籠5只，溫度20℃至26℃，濕度55%±15%，照明時間12h/12h。將小鼠隨機分為陰性對照組、陽性對照組和鹽附子高、中、低劑量組。

112 統計方法

結果用x±s表示,各組數據用SPSS11. 0統計軟件進行單因素方差分析。

1. 3 方法與結果

11311 自發活動試驗 小鼠50只,隨機均分為5組。SAC高、中、低劑量組小鼠分別ig生藥7168、3184、1192g·kg^-1陰性對照組給予蒸餾水;陽性對照組給予地西泮注射液5mg·kg^-1。分別于給藥后15、60min測定小鼠10min內自發活動的次數[1]。表1結果顯示, SAC高、中、低劑量組小鼠的自發活動次數與相應的陰性對照組比較,差異無統計學意義(P>0. 05)。SAC高劑量組小鼠與中、低劑量組的比較有所減少,但差異無統計學意義。11312 爬桿實驗 按“1. 3. 1”項方法分組、給藥。試驗前訓練小鼠兩天,使其學會爬桿。給藥30min后,將小鼠放在爬桿架的玻璃棒上,使肌肉處于靜力緊張狀態,記錄小鼠由于肌肉疲勞從棒上跌落的時間,累計3次的爬桿時間作為總的爬桿時間。SAC高、中、低劑量組小鼠的爬桿時間與相應的陰性對照組比較,差異無統計學意義(P>0. 05)。SAC高劑量組小鼠與中、低劑量組的比較有所減少,但差異無統計學意義。

11313 Morris水迷宮試驗 將Morris水迷宮分為四個象限,平臺置第一象限離水面約1cm處。先將小鼠放在平臺上使其熟悉平臺30 s,再將小鼠從與平臺相對的象限面壁放入迷宮,以小鼠找到隱藏平臺的時間為逃避潛伏期。若120 s小鼠仍找不到平臺,則引導小鼠至平臺上,逃避潛伏期計為120 s。重復測定1次,取其平均值。除陽性對照組ip氫溴酸東莨菪堿注射液3mg·kg^-1外,其余按“1. 3. 1”項方法分組、給藥,各組均連續給藥4 d。每次給藥后30min進行水迷宮試驗,取第4天的結果為正式試驗結果。結果顯示, SAC高、中、低劑量組小鼠的逃避潛伏期與相應陰性對照組的比較,差異無統計學意義(P>0. 05)。

 

2 討論

附子具有強心、抗炎、鎮痛、抗腫瘤、調節免疫功能等作用,但又是常見的有毒中藥之一。其主要毒性成分為脂溶性二脂類生物堿,毒性表現為神經和心血管系統的嚴重損害。鹽附子、黑順片、白附片是臨床上常用附子的炮制品,其中又以鹽附子最為常用,故文中選用鹽附子來研究其急性神經毒性。鹽附子是附子的粗加工品,其毒性和藥理作用與生附子相比變化不大,故文中試驗結果也反映了生附子的急性神經毒性。實驗采取神經行為測試組合來研究鹽附子對小鼠神經行為功能的影響。給藥組與陰性對照組比較,差異均無統計學意義。但鹽附子高劑量組小鼠自發活動次數和爬桿時間與其他組比較均有所減少,差異無統計學意義�？赡茉�因是鹽附子急性神經毒性較低,短期給藥對小鼠自發活動次數和爬桿時間影響較小,故在較高的生藥劑量下才出現較小的毒性。試驗結果顯示,鹽附子生藥濃度為7168、3184、1192g·kg^-1時,未觀察到其對小鼠神經系統的急性毒性作用。