華盛頓大學X. H. Gao教授和埃默里大學R. M. O’Regan教授課題組,將525 nm, 565 nm, 605 nm, 655 nm 和705 nm發射波長的量子點,直接與HER2, ER, PR, EGFR 和 mTOR的一抗進行偶聯。上述分子是臨床重要的乳腺癌標志物,對于乳腺癌診斷、預后及個性化治療具有重要意義。該課題組將量子點偶聯抗體用于石蠟包埋組織切片染色,并進行了光譜定量分析,同時與IHC、Western blotting(WB)、FISH等方法進行比較。其研究結果顯示,當蛋白表達水平較低時,量子點的定量光譜分析比傳統IHC方法更精確,同時與WB方法相關性良好;FISH分析中,HER2基因擴增與基于量子點檢測的HER2蛋白表達相關性良好,而且量子點偶聯抗體可用于檢測低水平的HER2蛋白表達。
總之,量子點偶聯抗體可以很好地適用于腫瘤標志物的體外分子譜檢測分析,其優勢主要表現為:
①量子點的熒光亮度更強,靈敏度更高,可加強對低豐度靶點的檢出;
②量子點熒光探針耐光漂白、不會出現光淬滅,熒光穩定性強,非常適用于定量分析和光譜分析。
③單一激發、多色成像,不同顏色熒光之間干擾小,適合多指標同時成像和定量分析。
石蠟組織切片的多腫瘤標志物原位分子表達譜分析
上圖:不同發射波長(525/565/605/655 /705 nm)的量子點,分別與乳腺癌標志物HER2/ER/PR/EGFR/mTOR的一抗進行偶聯,然后對乳腺癌病人的病理切片進行五色共染。
下圖:針對上圖染色結果進行光譜定量分析。
文獻來源:
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