人Elisa試劑盒操作步驟 ：

1．用蓋片鑷人Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布。

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）。 

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時。 

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片完全浸在培養液中。

5．將人Elisa試劑盒培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

人Elisa試劑盒注意事項:

       1. 人Elisa試劑盒解凍與存放：-20℃取出后建議放入2～8℃冰箱中解凍約，每隔一段時間輕輕搖晃均勻，不可直接放入溫度較高處解凍，避免因溫度改變太大，造成蛋白質凝集而出現沉淀，血清的質量下降。若短期無法用完一瓶，建議無菌分裝,再放回冷凍，避免反復凍融。4℃長時間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白，形成絮狀物質變差。

      2. 人Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅活血清中補體系統，在極少數情況下（培養ES細胞，平滑肌細胞時）建議滅活，在培養其余細胞時不建議滅活血清。血清滅活非常容易產生沉淀，如必須滅活請按56℃，30 min，輕微搖晃原則操作，滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產生沉淀。

      3.人Elisa試劑盒培養基：無血清培養基在結果重復性、細胞體外分化方面有優勢，但是，血清仍然是培養液中最基本的添加物，尤其是在原代培養或細胞生長狀態不良時，常常會先使用有血清的培養液進行培養，待細胞生長旺盛后再換成無血清培養液。

人Elisa試劑盒樣本處理：

1．剛取得的新鮮組織樣本用PBS洗凈。

2．準確稱取50mg組織，加入1ml勻漿緩沖液A，用玻璃勻漿器充分勻漿。

3．在1000g，4℃離心10分鐘，棄沉淀，取上清。