植物直接PCR試劑盒注意事項與特點
瀏覽次數:189 發布日期:2020-12-18
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植物直接PCR試劑盒注意事項:
1.本植物直接PCR試劑盒只適合于多糖多酚含量低的植物葉片樣本,如小麥、水稻、煙草、玉米、大豆、油菜等。不適合多糖多酚含量高的植物樣本。
2.建議使用新鮮采取的葉片組織,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響PCR效率。葉片組織以幼嫩為宜,若為成熟的葉片,避免使用葉片主脈部位組織。
3.電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時會在泳道中出現一大團拖尾亮帶,影響實驗結果。
4.建議擴增片段長度1 kb以內,以便擴增效率最佳。
5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
植物直接PCR試劑盒技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
植物直接PCR試劑盒特點:
1.一管式操作,用戶只需要提供樣品即可。
2.根據大豆熱休克蛋白基因保守區域設計引物,能專一性檢測出樣品中的大豆成分,但不能檢測其他非大豆成分。
3.快速,整個檢測過程(按一個樣品計)所需時間僅為 2.0 小時。
4.只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀,無需配置貴重儀器設備。
5.對混合樣品中大豆成分的檢測下限為 0.1%,對樣品中大豆成分的核酸檢測下限為 1.0ng/μL。
6.本只能用于科研,足夠 50 次 40uL 體系的常規 PCR。