科研elisa試劑盒收集方法
瀏覽次數(shù):168 發(fā)布日期:2021-3-11
來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
科研elisa試劑盒操作細節(jié):
1、實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù),標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
2、在儲存和溫育時避免強光直接照射。
3、不管是進口elisa試劑盒,還是其它產(chǎn)品,在使用之前都要仔細閱讀說明書,同時確定試劑盒是不是在有效期內(nèi)。
4、若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
5、嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
6、選擇抗體時醉好選擇一個單抗和一個多抗進行配對,若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體,醉好從同一家公司選擇抗體。
7、建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結(jié)果偏差。
8、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
9、按說明書將所用進口elisa試劑盒平衡至室溫,配制所需試劑盒,DIY夾心法ELISA常見技術指南。
科研elisa試劑盒收集方法:
1、不抗凝收集血清
(1)無添加劑的干燥空管收集
血管內(nèi)壁均勻涂有防止掛壁的藥劑(硅油)。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固,等血清自然析出后,離心使用。主要用于血清生化(肝功、腎功、心肌酶、淀粉酶等)、電解質(zhì)(血清鉀、鈉、氯、鈣、磷等)、甲狀腺功能、藥物檢測、艾滋病檢測、腫瘤標志物、血清免疫學檢測。亦可直接用干燥EP管收集全血,充分靜置使得紅細胞充分自然凝固后,離心分離出血清待用或保存。
(2)用促凝管收集
采血管內(nèi)壁均勻涂有防止掛壁的硅油,同時添加了促凝劑。促凝劑能激活纖維蛋白酶,使可溶性纖維蛋白變成不可溶性的纖維蛋白聚體,進而形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊,如果想快點出結(jié)果,可采用促凝管。一般靜置半小時到1小時,直接離心分離出血清待用或保存,常用于急診生化。
(3)含有分離膠及促凝劑的采血管收集
管壁經(jīng)過硅化處理,并涂有促凝劑可加速血液的凝固,縮短檢驗時間。管內(nèi)加有分離膠,分離膠與PET管具有很好的親和性,確實起到隔離作用,一般即使在普通離心機上,分離膠能將血液中的液體成分(血清)和固體成分(血細胞)徹底分開并積聚在試管中形成屏障。離心后血清中不產(chǎn)生油滴,主要用于血清生化(肝功、腎功、心肌酶、淀粉酶等)、電解質(zhì)(血清鉀、鈉、氯、鈣、磷等)、甲狀腺功能、藥物檢測、艾滋病檢測、腫瘤標志物、血清免疫學。