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RF因子IgG抗體ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明

瀏覽次數(shù):195 發(fā)布日期:2024-10-12  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
原理:
本試劑盒采用純化RF抗原預(yù)包被板ELISA原理,并配以酶標(biāo)記抗人IgG(h+L)鏈單克隆抗體作為標(biāo)記物。加入底物TMB顯色后終止反應(yīng),在450nm波長(zhǎng)測(cè)各孔O.D值,O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。試劑的特異性高、靈敏度好、穩(wěn)定性極大地提高是本試劑含有的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)。

用途:
本試劑盒用于定性檢測(cè)人血清/血漿/乳汁等標(biāo)本中的RF因子IgG抗體。

試劑盒組成:
1、抗原預(yù)包被反應(yīng)板           1塊(8X12/4X12)
2、陰性對(duì)照                   1瓶(直接使用)         
3、陽(yáng)性對(duì)照                   1瓶(直接使用)           
4、標(biāo)本稀釋液                 1瓶(20/10 ml,直接使用)
5、酶結(jié)合物                   1瓶(10/5ml,直接使用)
6、30X濃縮洗液               1瓶(20/10ml,加蒸餾水1:30稀釋使用)
7、顯示劑A、B液            各1瓶(5/2.5ml)
8、終止液(2M H2SO4)        1瓶(5/2.5ml)
9、說(shuō)明書(shū)                     1份

操作步驟:
1.  將試劑盒平衡至室溫后取出反應(yīng)板拆封。
2.  加樣:每孔加標(biāo)本稀釋液200ul,再分別加待檢標(biāo)本5ul(1:41),設(shè)陰陽(yáng)性對(duì)照(100ul各一孔)于反應(yīng)板中,設(shè)空白對(duì)照一孔(加100ul標(biāo)本稀釋液),輕拍混勻。
3.  37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液連續(xù)洗板3次每次在吸水紙上拍干。
4.  加酶結(jié)合物:每孔2滴(或100ul),混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。
5.  顯色:每孔加顯色劑A、B各1滴(或50ul),輕拍混勻(或震蕩器混勻)后置37℃10分鐘。

結(jié)果判斷:
1.  目測(cè):在白色背景下觀察各孔顯色情況,蘭色者為陽(yáng)性,無(wú)色者為陰性。
2.  酶標(biāo)儀測(cè)定:每孔加終止液1滴(或50ul),混勻后在450nm下測(cè)定各孔O.D值。
① P/N=標(biāo)本O.D值/陰性對(duì)照O.D值。
② P/N≥2.1為陽(yáng)性;  
③ P/N∠2.1為陰性。  
④ 陰性對(duì)照小于0.10時(shí)以0.10計(jì)。
⑤ 肉眼可見(jiàn)蘭色,但酶標(biāo)儀測(cè)出OD值小于0.21者,為可疑標(biāo)本,應(yīng)擇日重復(fù)。  

注意事項(xiàng):
1.      微孔板須密封防潮,從冷藏環(huán)境中取出時(shí),應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開(kāi)啟使用,余者封存置2-8℃。
2.      滴加試劑前應(yīng)將液體翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻,滴加時(shí)保持瓶身垂直。
3.      洗滌時(shí)每孔均須加滿(mǎn),防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。
4.      試劑置2-8℃存放,不能凍結(jié),有效期10個(gè)月。
5.      避免用溶血、混濁或脂血標(biāo)本。
6.      最好用新鮮標(biāo)本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小時(shí)或-20℃凍存4周(樣本應(yīng)避光)
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