免疫組化假陰性和假陽性結果的原因:
1、假陰性結果的原因主要是:
(1)抗體已失活或濃度不當或抗體本身達不到應有的敏感度;
(2)由于組織自溶,抗原擴散而導致抗原消失,特別在長期固定的標本中因抗原漏出而致假陰性,因此應多用新鮮固定之標本;
(3)操作步驟不當,如反應時間不夠或過久、洗脫不夠或溫度過高;
(4)組織或細胞中抗原的含量很低,所用的方法難以檢測到,如用直接法檢測為陰性,但改用間接法時則為陽性。
2、假陽性結果的主要原因是:
(1)所用的抗體與其它無關的抗原有交叉反應,特異性差,特別在應用多克隆抗血清時更易出現;
(2)所用抗體濃度過高或染色過程中切片干燥導致抗體與組織產生非特異性結合;
(3)組織或細胞中有內源性過氧化物酶、堿性磷酸酶及生物素等產生非特異性顯色;