1. 為什么蛋白質降解會成為WB實驗的“絆腳石”?
在細胞裂解或組織提取過程中,原本隱藏在各種細胞器中的蛋白酶可能會被激活,從而導致蛋白質降解。這種降解不僅會破壞目標蛋白的完整性,還會影響后續的檢測效果。例如,目標蛋白可能因為降解而無法被抗體特異性識別,或者在電泳過程中出現多條降解條帶,干擾實驗結果的解讀。因此,從樣本處理的第一步開始,防止蛋白質降解就顯得至關重要。AbMole是ChemBridge中國區官方指定合作伙伴。
AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(M5293)是一款含有多款抑制劑的復合物,它包含了多種高效、特異性的蛋白酶抑制劑,由AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Bestatin、E-64、Pepstatin-A等6種不同的蛋白酶抑制劑優化配比配置而成,相較于傳統的由單一組分構成的蛋白酶抑制劑如PMSF,能夠更加廣泛地抑制絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等多種常見蛋白酶的活性。這種全方位的保護機制,從樣本提取的那一刻起,就為您的目標蛋白提供了堅實的防護。另外一方面,PMSF具有一定的毒性和腐蝕性且半衰期較短。而AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(M5293)則具有低毒和較強的穩定性,可有效解決大家使用PMSF時的擔憂。
AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(Protease Inhibitor Cocktail,M5293)除了用于WB實驗以外,還能為免疫共沉淀 (Co-IP)、pull-down、免疫沉淀 (IP)、免疫組織化學 (IHC)、免疫熒光 (IF)、酶學研究等多種實驗中的蛋白提供保護。
3.成功案例
案例1. 研究人員利用WB實驗、代謝組學分析等技術篩選與PDAC肝轉移有關的關鍵代謝物。實驗中使用了來自AbMole的兩個爆款產品,即蛋白酶抑制劑Cocktail (M5293)和磷酸酶抑制劑Cocktail(M7528)對蛋白進行保護,兩款抑制劑有效避免了蛋白的降解并保護蛋白的磷酸化狀態。
案例2. 研究人員發現FDFT1在肝細胞癌(HCC)中的表達與膽固醇和膽汁酸水平的變化相關,并通過HNF4A/ALDOB/AKT1軸影響HCC的進展。在研究FDFT1的功能時,實驗人員使用來自AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(M5293)為動物組織的蛋白提取提供保護。
案例3. 科研人員研究了miR-30a-5p/CLCF1軸在肝細胞癌(HCC)中的Sorafenib耐受性和有氧糖酵解中的作用。在驗證CLCF1的敲低以及對下游信號蛋白的影響時,實驗人員使用了AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(Protease Inhibitor Cocktail,M5293)為蛋白提供保護。
AbMole多年來持續聚焦生命科學研究和新藥研發最新動態,為全球科研客戶提供高純度、高生物活性的各類小分子抑制劑、細胞因子、天然產物、抗生素和人源化單抗等試劑。
參考文獻及鳴謝
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