P16是一種抑癌基因，與細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)，通過抑制CDK4和CDK6的活性來阻止細(xì)胞進(jìn)入S期，在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂G1-S期過程中起關(guān)鍵作用。

在宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）病變時，P16表達(dá)水平異常升高，表現(xiàn)為P16蛋白的異常核及胞漿陽性。可用于宮頸癌高級別鱗狀上皮病變與化生、萎縮等的鑒別。

Ki-67是一種細(xì)胞增殖標(biāo)志物，Ki-67在細(xì)胞周期的G1、S、G2和M期均有表達(dá)，但在細(xì)胞處于靜止期（G0期）或凋亡時不表達(dá)。

Ki-67的檢測在乳腺癌、肺癌、結(jié)腸癌等癌癥中的診斷和分級中都有應(yīng)用。Ki-67值的高低直接反映了腫瘤細(xì)胞增殖的活躍程度，也是判斷腫瘤惡性程度和預(yù)后一個重要的標(biāo)志物。

子宮頸癌
子宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一, 發(fā)病率在我國女性惡性腫瘤中位居第二。

高危型人乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染是引起子宮頸癌和子宮頸上皮內(nèi)病變的主要病因，尤其是HPV的某些高危型別，如HPV 16和HPV 18。子宮頸高級別上皮內(nèi)病變包括高級別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）及原位腺癌（AIS）。HSIL包括子宮頸鱗狀上皮內(nèi)瘤變（CIN）2 級和3級，主要由HPV感染后引起，細(xì)胞有明顯的異型性，核分裂象增多。

宮頸癌發(fā)展緩慢，能需要數(shù)年時間才能從前期病變發(fā)展為侵襲性癌癥。宮頸癌前病變和宮頸癌早期可能沒有任何癥狀，且子宮頸癌治療效果和預(yù)后欠佳，因此定期進(jìn)行宮頸癌篩查對早期發(fā)現(xiàn)和治療宮頸癌至關(guān)重要。

目前傳統(tǒng)的子宮頸癌篩查多是使用細(xì)胞學(xué)/HPV初篩，但其特異性和靈敏度都不高。2023年，《老年女性子宮頸病變篩查及異常管理中國專家共識》將p16/Ki-67細(xì)胞學(xué)雙染納入篩查方案。

p16/Ki-67雙染
p16/Ki-67雙染檢測是一種用于宮頸癌前病變診斷的免疫細(xì)胞化學(xué)檢測方法，樣本類型為宮頸脫落細(xì)胞。檢測原理是正常細(xì)胞不會同時出現(xiàn)p16和Ki-67過度表達(dá)，雙染陽性則提示提示高危型HPV持續(xù)性感染，與高級別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）相關(guān)。

圖1 老年女性以HR-HPV為基礎(chǔ)的子宮頸病變查及異常管理流程。HR-HPV：高危型人乳頭瘤病；TCT：薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查；ASC-US:不典型鱗狀上皮細(xì)胞。

已有大量研究使用臨床樣本進(jìn)行篩查方法比較：
Mariam El-Zein研究收集492個宮頸樣本進(jìn)行雙染檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：①雙染細(xì)胞學(xué)檢測的陽性率隨著組織學(xué)嚴(yán)重程度的增加而增加，從正常組織的30.6%到癌癥組織的87.5%。②雙染細(xì)胞學(xué)單獨使用時，對于CIN2+和CIN3+的敏感性低于HPV檢測，但在CIN2+和CIN3+的特異性上分別提高了7.9%和9.6%。

在中國也有相關(guān)臨床樣本研究：選取537名年齡在20至79歲之間的女性的宮頸脫落細(xì)胞，p16/Ki-67的特異性在檢測CIN2+和CIN3+中都高于HR-HPV檢測（CIN2+為85.96%對比67.54%，CIN3+為79.84%對比62.90%），雙染可作為管理ASC-US女性的有效分流方法。

p16/Ki-67雙染診斷優(yōu)勢
在臨床上，p16/Ki-67雙染檢測在宮頸癌篩查中具有極高靈敏度，其特異性和靈敏性都優(yōu)于HPV檢測和細(xì)胞學(xué)檢測。有助于提高宮頸癌前病變的檢出率，也減少陰道鏡的過度干預(yù)。

p16/Ki-67雙染檢測不受HPV不同亞型的影響，可獨立評價病變嚴(yán)重程度，p16/Ki-67雙染的陽性率，隨著宮頸病變的嚴(yán)重程度升高而升高，可減少延誤診斷。

p16/Ki-67雙染可以避免單染帶來的定位差異，通過陽性細(xì)胞在鱗狀上皮的定位，結(jié)合TCT與HPV檢測可用于監(jiān)測HSIL(CINII/II)的復(fù)發(fā)，可對宮頸CIN的病理診斷、分級和分層管理。

雙染檢測不受細(xì)胞形態(tài)學(xué)影響，細(xì)胞質(zhì)染色為特異性棕色(p16)、細(xì)胞核染色為特異性紅色(Ki-67)，僅通過顏色變化即可進(jìn)行判別，用于輔助診斷宮頸癌前病變。通過更客觀簡便的判讀方式，而非通過形態(tài)學(xué)，操作簡便性和準(zhǔn)確性都大幅度提升。

圖2 子宮頸上皮細(xì)胞p16/Ki-67雙染陽性

隨著中國人口老齡化和經(jīng)濟(jì)社會發(fā)展欠均衡，部分地區(qū)的子宮頸病變篩查率低，我們子宮頸癌患者發(fā)病人數(shù)也逐漸升高，提高篩查人數(shù)和優(yōu)化篩查方式刻不容緩。p16/Ki-67雙染檢測技術(shù)為宮頸癌的早期診斷提供了一種更為簡便、安全且高效的篩查方法，為宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)和治療提供了強有力的支持。

S-RMab®單克隆抗體
斯達(dá)特p16&Ki-67單克隆抗體，重組兔單抗，具有更高的特異性、靈敏度、穩(wěn)定性，細(xì)胞定位準(zhǔn)確，為臨床提供更準(zhǔn)確的診斷結(jié)果。

產(chǎn)品信息


參考文獻(xiàn)

[1] Shao-Kai,Zhang,Man-Man,et al.Evaluation of p16/Ki-67 dual staining in the detection of cervical precancer and cancer in China.[J].Cancer Epidemiology, 2019.DOI:10.1016/j.canep.2018.12.013.

[2] Kakaliashvili-Dzagnidze, Sopio, Omar Khardzeishvili, and Sergo Tabagari. "Diagnostic Accuracy of p16 INK4a/Ki-67 Dual Immunostaining for Detection of High-Grade Cervical Intraepithelial Neoplasia in Women Involved in Cervical Cancer Screening in Georgia." Analytical Cellular Pathology 2023 (2023).

[3] Mariam El‐Zein, Gotlieb W , Gilbert L ,et al.Dual staining for p16/Ki‐67 to detect high‐grade cervical lesions: Results from the Screening Triage Ascertaining Intraepithelial Neoplasia by Immunostain Testing study[J].International Journal of Cancer, 2021, 148(2):492-501.DOI:10.1002/ijc.33250.