DNP-BSA(2,4-二硝基苯偶聯牛血清白蛋白)在免疫學研究與檢測中的作用
DNP-BSA（2,4-二硝基苯偶聯牛血清白蛋白）是一種經典的半抗原-載體蛋白復合物。DNP（2,4-二硝基苯基）作為一個小分子半抗原，本身無法單獨誘導免疫反應，但當它與大分子的牛血清白蛋白（BSA）結合后，便成為了一個完整的免疫原，能夠高效激活免疫系統，誘導產生針對 DNP 的特異性抗體。AbMole的DNP-BSA（2,4-Dinitrophenyl-Bovine Serum Albumin，M58157）作為一種重要的免疫學工具，在很多領域中都有著重要的作用。AbMole為全球科研客戶提供高純度、高生物活性的抑制劑、細胞因子、人源單抗、天然產物、熒光染料、多肽、靶點蛋白、化合物庫、抗生素等試劑，全球大量文獻專利引用。
一、作為免疫原制備抗體
DNP-BSA（M58157，AbMole）常被用作免疫動物的免疫原，以制備抗 DNP 的特異性抗體。通過將 DNP-BSA 注射到動物體內，激活動物的免疫系統，使其產生針對 DNP 的 B 淋巴細胞和 T 淋巴細胞，進而分泌出特異性的抗體。這些抗體可以用于后續的免疫學實驗，例如檢測抗原抗體反應、研究抗體的特異性和親和力等。
二、動物過敏反應造模劑
DNP-BSA（2,4-二硝基苯基-牛血清白蛋白）（M58157，AbMole）是一種常用的過敏反應抗原，可用于誘導動物產生過敏反應以及構建動物過敏模型。可通過注射DNP-BSA作為抗原誘導動物產生IgE抗體，或者直接注射抗DNP的IgE抗體等兩種不同的方式使實驗動物進入致敏狀態。然后在一定時間后，通過靜脈注射DNP-BSA進行抗原挑戰，以誘導過敏反應。可通過檢測體溫變化、血清中炎癥介質水平、以及通過切片觀察組織中肥大細胞的脫顆粒情況和炎癥細胞的浸潤情況等方法判斷過敏反應的發生。
圖1. 利用抗DNP的IgE和DNP-BSA處理小鼠構建過敏模型[1]
三、免疫耐受研究
DNP-BSA（M58157，AbMole）既可以作為免疫原誘導免疫反應，也可以用于研究免疫耐受的機制。通過不同途徑（如皮下注射、腹腔注射、口服等）給動物注射DNP-BSA，可以誘導不同程度的免疫耐受。低劑量的DNP-BSA可以通過口服或皮下注射的方式誘導免疫耐受。這種耐受通常是通過調節性T細胞（Tregs）的作用實現的。Tregs可以分泌抑制性細胞因子（如IL-10和TGF-β），從而抑制效應T細胞的活化和增殖[2]。高劑量的DNP-BSA可以通過靜脈注射的方式誘導免疫耐受。這種耐受通常是通過克隆無能（clonal anergy）實現的[3]。克隆無能是指T細胞或B細胞在抗原刺激下無法被充分激活，從而無法產生有效的免疫反應。2014年，AbMole的兩款抑制劑分別被西班牙國家心血管研究中心和美國哥倫比亞大學用于動物體內實驗，相關科研成果發表于頂刊 Nature 和 Nature Medicine。
四、免疫檢測和免疫層析
免疫層析技術是一種基于抗原抗體特異性反應的膜檢測方法。它以硝酸纖維素膜為固定相，該膜上固定有檢測線（包被抗體或抗原）。測試液作為流動相，而熒光或膠體金標記的抗體或抗原則固定在玻璃纖維材質的結合墊上。通過毛細管作用，待測物在層析條上移動。在流動相的作用下，待測物首先與熒光標記的抗體或抗原結合，隨后在到達檢測線時與包被的抗體或抗原結合，形成熒光或膠體金條帶，從而實現檢測目的。然而，在生產、儲存和運輸過程中，現有的免疫層析檢測試紙條可能出現問題，導致檢測結果出現假陰性。為避免假陰性結果，通常在硝酸纖維素膜上設置一條質控線（C線）。常見的質控線系統包括羊抗鼠多克隆抗體系統、雞IgY/羊抗雞IgY系統等。近年來，DNP-BSA作為一種新興的質控線系統受到關注。由于2,4-二硝基苯酚（DNP）是動植物體內不存在的小分子化合物，DNP-BSA系統利用抗DNP的抗體和DNP-BSA構建質控線，展現出良好的穩定性和低干擾性。DNP-BSA（2,4-二硝基苯偶聯牛血清白蛋白，M58157，AbMole）可滿足免疫層析中的膠體金檢測或免疫熒光檢測，目前是很多免疫層析產品（抗原檢測、病毒檢測）中重要的質控系統。
圖2. 免疫層析的一般原理圖
參考文獻：
[1] GUO X, LEI Y, XU Y, et al. PRL2 negatively regulates FcεRI mediated activation of mast cells [J]. Cell death & disease, 2025, 16(1).
[2] MAJEWSKA-SZCZEPANIK M, ZEMELKA-WIĄCEK M, PTAK W, et al. Epicutaneous immunization with DNP-BSA induces CD4+ CD25+ Treg cells that inhibit Tc1-mediated CS [J]. Immunology and cell biology, 2012, 90(8): 784-95.
[3] PAUL W E, THORBECKE G J, SISKIND G W, et al. The effect of dose in tolerance induction on the subsequent response to a cross-reactive antigen [J]. Immunology, 1969, 17(1): 85-92.
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