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影響花藥培養的主要因素

瀏覽次數:2604 發布日期:2016-3-9  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

花藥培養是用植物組織培養技術,把發育到一定階段的花藥,通過無菌操作技術,接種在人工培養基上,以改變花藥內花粉粒的發育程序,誘導其分化,并連續進行有絲分裂,形成細胞團,進而形成一團無分化的薄壁組織——愈傷組織,或分化成胚狀體,隨后使愈傷組織分化成完整的植株。影響花藥培養的因素包括以下5個方面。

1、基本培養基
基本培養基的選擇因植物種類和品種而異。MS培養基和H培養基適合雙子葉植物花藥培養;B5培養基適合豆科與十字花科植物花藥培養;Nitsch培養基適合蕓薹屬和曼佗羅屬植物花藥培養;而禾谷類植物的花藥培養常采用N6、C17和W14等培養基。
 
2、無機鹽
培養基中高濃度的銨離子顯著抑制花粉愈傷組織形成。鐵鹽對花粉胚狀體發育很重要,如在Fe-EDTA濃度小于40μmol/L的低鐵或無鐵培養基上,煙草花粉胚只形成多細胞原胚體(球形胚)便停止發育。
 
3、生長調節劑
生長調節劑的種類與濃度對花粉的啟動、分裂、分化具有關鍵的作用。細胞分裂素也椰汁促進花粉分化成胚狀體,生長素類尤其2,4-D促進愈傷組織形成,但2,4-D抑制愈傷組織分化成胚狀體。高濃度生長素甚至可引起茄科花粉胚狀體轉化為愈傷組織。因此,誘導愈傷組織分化成苗,應將其轉入無2,4-D或含有低濃度IAA,NAA與較高濃度細胞分裂素的分化培養基上。煙草、水稻等少數植物的花藥可在不含生長調節劑的培養基上形成愈傷組織或花粉胚。
 
4、蔗糖
蔗糖作為碳源和調節培養基滲透勢的物質,其濃度對花粉愈傷組織誘導率有一定的影響,例如誘導油菜、煙草花粉愈傷組織或胚狀體的適宜蔗糖濃度是2%-3%,水稻則是4%-8%,甘蔗則高達20%,但對大多數植物來說是2%-4%。在許多植物花藥和花粉培養中,誘導花粉形成愈傷組織階段,宜采用較高濃度蔗糖,而愈傷組織分化成苗階段宜用較低濃度的蔗糖。
 
5、附加物
添加天然有機物如水解乳蛋白、水解酪蛋白、椰子汁、酵母提取液等,是對基本培養基組成成分和生長調節劑的補充,可提高花粉愈傷組織和胚狀體誘導率,對促進其生長有良好的效果。此外,活性炭也能促進胚狀體發育,提高花粉植株產量,且已經在煙草、油菜、馬鈴薯等植物中被先后證實。

NAA   http:///cn/br/Medium/04/Medium8749369023027889.htm

2,4-D    http:///cn/br/bm/01/P266600.htm

MS培養基 http:///cn/br/Medium/02/P215750.htm

發布者:北京啟維益成科技有限公司試劑部
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