Simoa單分子免疫陣列分析技術是目前市面上最靈敏的蛋白分子檢測技術之一，可以檢測單個蛋白分子，靈敏度達到飛克級別。依托Simoa超高靈敏檢測平臺，可對外周血中低含量神經因子進行精準定量，加速神經領域生物標志物的研究進程，助力中國人群隊列研究。

由Quanterix公司主辦，SBC共同參與的N4PE免費測樣活動進入尾聲，檢測報告正在陸續發出，今天就講講如何解讀這些報告中的數據圖表。

四個檢測指標

• NfL，神經元的細胞質中間絲蛋白，與微管和微絲一起形成神經元細胞骨架。Nf-L是與腦損傷、腦中風、多發性硬化癥、癡呆和其他神經退行性疾病相關神經元損傷的生物標志物，是研究神經性疾病最有力的工具之一。
• Aβ40/Aβ42，由淀粉樣前體蛋白經 β-和 γ-分泌酶的蛋白水解作用而產生的含有40/42個氨基酸的多肽。Aβ的沉積不僅與神經元的退行性病變有關，而且可以激活一系列病理事件，包括星型膠質細胞和小膠質細胞的激活、血腦屏障的破環和微循環的變化等，是阿爾茨海默病人腦內老年斑周邊神經元變性和死亡的主要原因。
• GFAP，膠質纖維酸性蛋白，中樞神經系統中星形膠質細胞表達的蛋白，與多種疾病相關，如創傷性腦損傷、中風、腦腫瘤等。近期揭示其在阿爾茨海默早期出現異常升高，具有作為疾病早期生物標志物的潛在可能。

樣本的復核，試劑盒信息以及樣本前處理信息

由于樣本中殘余的細胞碎片，較大細胞器以及密度較大的多聚體可能會影響免疫反應的充分進行以及后續的圖像解析，所以在上樣之前每個樣本在充分解凍后會進行10000g 5min的離心來去除這些物質。

標曲信息

標曲相當于一個實驗的“尺子“，用來計算測得樣本的真實濃度，標曲的好壞是衡量一次定量檢測實驗的重要指標。

以圖中的NfL標曲為例，首先是每個濃度點的CV值，也就是重復測量的離散程度，CV小于20%即認為合格，實際上大多數標曲點的CV是小于10%的，說明標準品檢測的精準性還是很高的。其次是R2，即標準曲線的回歸系數，也就是每個標準品的點與標準曲線的離散程度，R2越高說明標曲的擬合度越好，這把“尺子”的衡量力就越好。此外，標曲的橫坐標是濃度，單位是pg/mL，縱坐標是AEB，是Average Enzyme per Bead的縮寫，即平均每個磁珠上攜帶的酶的個數。AEB是Simoa磁珠平臺的信號強度單位，當形成磁珠-待檢物-酶的復合物時，我們認為磁珠攜帶了酶，是陽性磁珠，但是每個反應中會有數萬的磁珠參與反應，那么平均每個磁珠上攜帶的酶的個數究竟是0.1還是1還是10，會有軟件通過數字/模擬算法得出。簡而言之，AEB實際就是Simoa平臺中響應信號強度的表達方式。

LOD（檢出下限）以及LLOQ（定量檢測下限）

每個因子均標有其對應的LOD和LLOQ，飛克級別的靈敏度是足以將正常人群中的基線水平進行絕對定量檢測。

質控結果

每次實驗會設置兩個質控，分別為高濃和低濃質控，各重復兩次。質控不僅能預示此次實驗的精確度（重復之間的CV%），還能預實準確度。

樣本結果

下圖中淡黃色區域分別為四個神經因子指標的檢測結果，濃度為pg/mL。另外，最終濃度是乘以稀釋倍數之后的濃度。

以上數據來自Quanterix，共進行了75個血漿/血清樣本、每個樣本4個神經因子的檢測，檢出率高達95%。