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DNA甲基化、RNA甲基化、ChIP-seq、單細胞轉錄組等應用文章精選

瀏覽次數:428 發布日期:2025-1-8  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
DNA甲基化研究
(1)RRBS項目:DNA甲基化+轉錄組等多組學分析揭示IDH1-R132H突變加劇順鉑誘導腎毒性
期刊:Cell Death & Differentiation   影響因子: IF 13.7     樣本:小鼠 細胞
本研究通過簡化基因組甲基化測序(RRBS)和對應的轉錄組測序(RNA-seq)分析發現IDH1-R132H突變會使得NDUFA1啟動子區甲基化增加,導致其表達下調,抑制了NDUFA1和FSP1之間的相互作用,從而影響FSP1在線粒體中的定位及其將泛醌還原為泛醇的能力,線粒體ROS和脂質過氧化物的積累,進而加劇順鉑誘導的腎小管上皮細胞氧化損傷和鐵死亡。這一研究揭示了IDH1-R132H突變在順鉑誘導的腎損傷中的關鍵作用,提示靶向NDUFA1和FSP1之間的相互作用可能是防止順鉑誘導腎毒性的治療策略,為攜帶IDH1-R132H突變的腫瘤患者提供更個性化的治療策略,以減少腎損傷的發生。

 
RRBS測序分析
 

RRBS測序對差異上調啟動子區域的基因進行GO富集分析
 
(2)scRRBS項目:單細胞甲基化+轉錄組多組學分析揭示哺乳期母體低蛋白飲食對子代的跨代傳遞
期刊:Journal of Genetics and Genomics   影響因子: IF 6.6     樣本:小鼠 卵母細胞
本研究利用母體哺乳期低蛋白飲食(LPD)小鼠模型,展示了母體LPD在哺乳期會導致存活率下降和生長遲緩,顯著減少排卵和窩仔大小,并改變雌性LPD子代的新陳代謝、腸道微生物組和卵母細胞轉錄組。LPD-F1中期II(MII)卵母細胞轉錄組測序分析結果表明,差異表達基因在女性妊娠和多個代謝過程中富集。母體LPD導致早期生長遲緩并損害代謝健康,這些影響可以傳遞超過兩代。研究還利用采用單細胞簡化基因組亞硫酸鹽測序 (scRRBS)來分析LPD和LPD-F1卵母細胞甲基化模式變化部分可以傳遞給F2卵母細胞,闡明哺乳期間母體營養如何影響子代的生殖細胞 DNA 甲基化,從而探索跨代傳遞機制。總之,本研究結果揭示了LPD在哺乳期通過卵母細胞表觀遺傳變化跨代傳遞影響子代健康。

 
LPD-F1卵母細胞中的整體DNA高甲基化
 
LPD-F1卵母細胞中的差異甲基化區域(DMRs)分析

(3)微量WGBS項目:微量DNA甲基化分析揭示MeCP2在卵子發生和卵巢衰老中的表觀遺傳調控
期刊:Cellular and Molecular Life Sciences   影響因子: IF 8     樣本:小鼠 卵母細胞
本研究通過對野生型ICR小鼠和轉基因小鼠的一系列比較分析結果表明,MeCP2蛋白在原始卵泡和初級卵泡中高表達,但在次級卵泡中幾乎檢測不到。但在衰老卵巢中,卵母細胞和顆粒細胞中的MeCP2蛋白顯著增加。生長中的卵母細胞中的MeCP2過表達會導致轉錄失調、DNA高甲基化和基因組不穩定,最終導致卵泡生長停滯和凋亡。DCAF13是Cullin 4-RING(CRL4)E3連接酶的底物識別接頭,可以靶向MeCP2,并在細胞和卵母細胞中被多泛素化以進行降解。Dcaf13基因敲除的卵母細胞表現出MeCP2蛋白積累,并且在MeCP2敲低后部分挽救了由Dcaf13缺失誘導的卵泡生長停滯。RNA-seq結果揭示生長中的卵母細胞中,大量基因受DCAF13-MeCP2軸調控。本研究表明,CRL4DCAF13 E3泛素連接酶靶向MeCP2進行降解,以確保生長中的卵母細胞中正常的DNA甲基化和轉錄。此外,在衰老的卵泡中,觀察到DCAF13和DDB1蛋白的死亡,表明了一種潛在調控卵巢衰老的新機制。

 
MeCP2在生長中的卵母細胞中過表達導致CpG島的DNA高甲基化
 
RNA甲基化研究
(1)m5C RNA-BS項目:RCMS編輯系統在特定細胞RNA位點的靶向m5C甲基化和去甲基化研究
期刊:Nucleic Acids Research   影響因子: IF 16.6    樣本:細胞
本研究作者開發了一種基于CRISPR-Cas13d的編輯系統,名為重編程m5C修飾系統(RCMS),用于特定轉錄本中的靶向m5C甲基化和去甲基化。通過m5C RNA-BS等分析揭示RCMS編輯系統能夠精確地在特定RNA位點添加或去除m5C修飾,改變細胞轉錄本穩定性。

 

RCMS dCasRx-NSUN6 編輯器的特異性和非靶甲基化測序
 
(2)m5C RNA-BS項目:NSUN2介導m5C修飾代謝重編程促進結直腸癌進展
期刊:Advanced Science   影響因子: IF 14.3    樣本:人 腎細胞
本研究通過RNA-BS等分析鑒定出m5C甲基轉移酶NSUN2在CRC中表達水平升高及其在結直腸癌(CRC)中的致癌作用,以及潛在的遺傳和分子機制。NSUN2誘導的代謝重編程以m5C依賴性方式調控ENO1表達增強葡萄糖代謝,導致CRC細胞中乳酸產生增加。此外,乳酸不僅通過組蛋白H3K18乳酸化(H3K18la)激活NSUN2轉錄,還誘導NSUN2在Lys356殘基(K356)發生乳酸化,這對于捕獲靶RNA和ENO1 mRNA m5C修飾至關重要。

 
RNA-BS+RNA-seq揭示NSUN2介導m5C修飾靶向CRC中的ENO1導致葡萄糖代謝重編程
 
(3)m6A項目:MeRIP-seq+RNA-seq揭示不同品種豬肌肉發育的m6A RNA甲基化差異
期刊:cells   影響因子: IF 5.1    樣本:仔豬 肌肉細胞
本研究鑒定了大約克豬(Large White, LW)和寧鄉豬(Ningxiang, NX)不同品種新生仔豬肌肉發育過程中的差異表達基因,并通過MeRIP-seq繪制了m6A甲基化模式。研究結果表明,m6A修飾在肌肉發育的新生仔豬階段調控肌肉細胞發育、肌原纖維、細胞周期和磷酸酶調節活性。且LW和NX豬中差異表達基因主要富集在參與蛋白質合成通路中。對MeRIP-seq和RNA-seq數據進行聯合分析,共鑒定出27個差異表達且m6A修飾基因。還鑒定出一種典型的肌肉特異性包膜跨膜蛋白WFS1,在LW和NX豬中通過m6A修飾被差異調控,進一步揭示了m6A修飾以YTHDF2依賴方式加速了WFS1降解。最后鑒定了WFS1最后一個外顯子中的C21551T導致m6A甲基化變化,從而影響LW和NX豬中的WFS1表達水平差異。本研究對NX和LW豬在新生仔豬肌肉發育期間的m6A修飾進行了全面分析,并闡明了m6A修飾對這兩個品種WFS1差異表達的調控機制。

 
LW和NX豬肌肉之間差異性m6A修飾比較
 
DNA與蛋白互作
(1)ChIP-seq項目:HPV編碼的環狀RNA  circE7促進頭頸部鱗狀細胞癌免疫逃逸
期刊:Nature Communications   影響因子: IF 14.7     樣本:人腫瘤組織、小鼠
本研究通過整合23對頭頸鱗癌(HNSCC)腫瘤樣本及其鄰近正常組織,以及105個HNSCC患者的石蠟包埋樣本,結合細胞和動物實驗、體內外實驗,揭示circE7通過表觀遺傳機制下調LGALS9基因(編碼Galectin-9蛋白),從而抑制T細胞功能和活性,進而促進HNSCC免疫逃逸。

 
圖:HN30細胞中過表達circE7的ChIP-seq和ChIP-qPCR分析
 
(2)ChIP-seq項目:c-di-AMP與DasR互作以調控細菌生長、發育和抗生素合成
期刊:Nature Communications   影響因子: IF 14.7     樣本:紅霉素生產菌
該研究將生產紅霉素的紅霉素生產菌(紅霉糖多孢菌,Saccharopolyspora erythrae)中的DasR鑒定為c-di-AMP的靶標,從而揭示c-di-AMP與該細菌中GlcNAc信號之間的直接聯系。研究還表明c-di-AMP結合刺激了DasR介導的GlcNAc攝取和利用抑制,并描述了c-di-AMP介導形成c-di-AMP連接的DasR二聚體形成的分子機制。由于GntR家族調控因子以二聚體形式與DNA互作,因此DasR的有效二聚體化激活了DasR對其目標調控子的調節。具體來說,DAC活性受到DasR的直接轉錄調控,從而形成調控環,調控從營養狀態到形態分化和抗生素合成的完整信號級聯。最后,系統發育分析和體外實驗進一步表明,c-di-AMP通過變構調節發揮全局調控作用,并通過DasR介導的信號整合在產生c-di-AMP的放線菌中可能是保守且必需的。

 

ChIP-seq分析在紅霉素產生菌中c-di-AMP升高對DasR依賴的全基因組影響

單細胞轉錄組
Smart-seq2項目:單細胞轉錄組測序揭示光療通過腦膜淋巴系統改善阿爾茲海默癥(AD)和衰老
期刊:Nature Communications   影響因子: IF 14.7     樣本:小鼠 海馬體
腦膜淋巴管(MLV)參與淀粉樣蛋白β(Aβ)的清除,被認為是阿爾茨海默。ˋD)的潛在治療靶點。本研究基于MLV的表層空間分布,采用近紅外光調節淋巴引流,顯著改善老年小鼠和AD(5xFAD和APP/PS1)小鼠的認知,并通過減少aβ沉積、神經炎癥和神經元損傷等來改善AD相關病理。此外透射電子顯微鏡成像和RNA測序(Smart-seq2)數據表明,通過光調節改善了腦膜淋巴管內皮細胞(MLEC)的線粒體代謝和細胞連接。這些研究共同表明,近紅外光治療可以通過恢復mLEC功能來增強MLV清除能力,從而改善認知功能?傊,光的淋巴引流增強促進了衰老和AD小鼠模型的病理緩解和認知增強,為神經退行性疾病提供了潛在的改善策略。

 
從海馬體(hippocampus,HPC)組織中提取總RNA并測序,揭示光對5xFAD小鼠海馬體相關基因表達的改善效果

微生物組
宏基因組測序項目:多組學分析揭示玉米青貯好氧變質及黃梁木葉精油對其影響的研究
期刊:Chemical Engineering Journal    影響因子: IF 13.3     樣本:青貯玉米
為了更好地理解青貯飼料的有氧變質過程及其潛在機制,以及黃梁木Neolamarckia cadamba(NCL)精油對這一過程的影響,研究者進行了宏基因組學、轉錄組學和代謝組學的分析。研究者在2021年制備了全株玉米青貯,并在暴露于空氣中的不同時間點(0、3、7、14天)進行了溫度、發酵質量、微生物群落和代謝物的分析。隨后,提取并分析了NCL精油的成分,并研究了其對從有氧惡化青貯中分離出的微生物菌株的抗菌活性。最后,在2022年,將NCL精油添加到全株玉米青貯中,研究其對青貯有氧穩定性的影響和機制。

 

全株玉米青貯在空氣中暴露14 d的變化
 
參考文獻:
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來源:深圳市易基因科技有限公司
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標簽: DNA甲基化
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