CarpTrans轉染試劑用于科學研究、工藝開發、臨床前和早期臨床試驗中重組蛋白/抗體的瞬時表達與AAV/AdV/LV的生產,GMP級可用于基因和細胞治療領域(CGT)中病毒載體的制備與生產。
適用細胞:常見細胞系,如Expi293, ExpiCHO-S, HEK293T等。
特點
* 高效轉染: CarpTrans 具有優異的轉染效率,即使對于難以轉染的細胞,也能實現高水平的基因表達或基因沉默。
* 廣譜性: 適用于多種細胞類型,包括原代細胞、干細胞、懸浮細胞和貼壁細胞。
* 低細胞毒性: 對細胞的毒性較低,能夠維持細胞的正常生理功能,提高實驗的可靠性。
* 操作簡便: 操作步驟簡單,易于掌握,無需特殊設備或復雜的培養基。
* 血清兼容性: 在含有血清的培養基中也能保持較高的轉染效率,無需更換無血清培養基。
CarpTrans轉染試劑的作用機制
1. 復合物形成: CarpTrans 試劑中的陽離子脂質體與帶負電荷的核酸分子(如 DNA、RNA)結合,形成穩定的復合物。
2. 細胞結合: 復合物通過靜電相互作用與細胞膜表面的帶負電荷的分子結合。
3. 內吞作用: 細胞通過內吞作用將復合物吞入細胞內,形成內吞體。
4. 內吞體逃逸: CarpTrans 試劑能夠破壞內吞體的膜結構,使核酸分子從內吞體中釋放出來,進入細胞質。
5. 核酸轉運: DNA 進入細胞核,進行基因表達;RNA 在細胞質中發揮作用,如 mRNA 翻譯或 siRNA 介導的基因沉默。
CarpTrans轉染試劑的應用
* 基因表達研究: 將含有目的基因的 DNA 質粒轉染入細胞,研究基因的表達調控、蛋白質功能等。
* 基因沉默研究: 將 siRNA 或 miRNA 轉染入細胞,沉默特定基因的表達,研究基因的功能。
* 藥物篩選: 將含有藥物靶點的細胞轉染入細胞,篩選能夠調控靶點基因表達的藥物。
* 基因治療: 將治療性基因轉染入患者的細胞,治療遺傳性疾病或獲得性疾病。
* 疫苗研發: 將編碼抗原的 DNA 或 RNA 轉染入細胞,誘導免疫反應,研發新型疫苗。
* 干細胞研究: 將轉錄因子轉染入干細胞,誘導干細胞分化為特定類型的細胞。
使用CarpTrans轉染試劑的注意事項
* 細胞狀態: 確保細胞處于良好的生長狀態,避免使用傳代次數過多的細胞。
* 核酸質量: 使用高質量的核酸,避免使用降解或污染的核酸。
* 試劑比例: 優化 CarpTrans 試劑與核酸的比例,以獲得最佳的轉染效率。
* 轉染時間: 根據細胞類型和實驗目的,選擇合適的轉染時間。
* 培養條件: 維持細胞的正常培養條件,避免劇烈的溫度變化或 pH 值波動。
* 毒性評估: 在進行大規模轉染實驗前,先進行小規模的預實驗,評估 CarpTrans 試劑對細胞的毒性。
總結
CarpTrans 轉染試劑是一種高效、廣譜、低毒的轉染試劑,廣泛應用于基因表達研究、基因沉默研究、藥物篩選、基因治療、疫苗研發和干細胞研究等領域。通過優化轉染條件,可以獲得更高的轉染效率和更可靠的實驗結果。