概念和原理

    Real-time PCR/real-time RT-PCR是在普通PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，最后可通過標準曲線或參比樣本對模板中目的DNA/RNA片段進行定量分析的技術。根據采用的熒光基團的不同，可以初略分為Taqman探針法和SYBR Green染料法。

科研和臨床應用

    由于可以從各種樣本中大量擴增目的基因片段并進行相對或絕對定量，因此，可廣泛應用于=感染性疾病病原體（如細菌、流感病毒、手足口病毒. HIV. HBV. HPV. EBV. CMV. TB.支原體、衣原體等）的檢測與定量分析、腫瘤相關基因的檢測與研究、藥物對基因表達水平的影響、與藥物療效監控相關的基因的檢測與研究等各種涉及到基因檢測的領域。

標本采集、保存、運輸

    全血樣本：用EDTA抗凝管收集2 ml全血，顛倒混勻抗凝管8-10次，-80℃保存，冷凍運輸。

    組織樣本：新鮮組織樣本離體后，用預冷PBS或生理鹽水快速將表面殘留的血跡沖洗干凈，切成黃豆大小，裝入2 0ml EP管或體積更大的旋蓋凍存管中，立即置于液氮中冷凍3-4 h以上，然后轉移至-80℃或液氮中保存，冷凍運輸。

    細胞樣本：離心收集細胞（≥1×1 06個），①DNA檢測：液氮速濤，-80℃保存，冷凍運輸：②RNA檢測：加入適量（如使用TRIzol，通常為1 ml）細胞裂解液，反復吸打數次，直至看不見成團的細胞塊，使之充分溶解于裂解液中形成清亮不粘稠的液體，-80℃保存，冷凍運輸。

客戶須知

客戶需提供：

    新鮮足量的檢測樣本（血液、骨髓、組織、細胞、咽試紙等）或提取的質量合格的足量RNA/DNA。

    需檢測的病原體名稱或基因名稱（中英文全稱）。

報告形式：

提供擴增曲線圖，ct值等。