Western Blot 即免疫印跡試驗，可以利用 Western Blot 來比較在不同條件下，不同細胞組織中目的蛋白表達量的差異，屬于定性，半定量試驗。既然有差異性比較，參照物必不可少。Western Blot 試驗中的標準（表達量）參照物即內參，有了參照物才能準確地比較目的蛋白表達量的差異。內參一般選用管家基因表達的蛋白，它們在各個組織細胞中表達相對恒定，不會因為外部條件變化而引起表達量的變化。而且內參可以監測整個試驗體系是否正常，比如蛋白提取過程，轉膜體系，顯色體系等。

三大內參：
1、beta Actin，肌動蛋白，細胞骨架蛋白。它們在各組織和細胞中的表達相對恒定，在檢測蛋白的表達水平變化時常用它來做參照物。beta Actin 作為內參是得到公認的，針對大多數組織和細胞來說的，它廣泛分布于細胞質內，表達量非常豐富。但是在一些少量特殊的情況下比如脂肪組織和細胞內，beta Actin 的表達量就很少。

2、GAPDH，甘油醛-3-磷酸脫氫酶，該酶是糖酵解反應中的一個酶，幾乎在所有組織細胞中都高水平表達，在同種細胞或組織中的表達量一般是恒定的，且很少受外部誘導物的影響。但比如缺氧和糖尿病等疾病存在下，會增加 GAPDH 在特定細胞和組織中的表達。

3、beta Tubulin，微管蛋白，細胞骨架蛋白。作為內參抗體，beta Tubulin 表達通常不會發生改變，因此被廣泛用于 Western Blot 內參，也常被用于免疫染色觀察細胞的微管結構。