牛探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法及產品特點
瀏覽次數:181 發布日期:2024-8-2
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原理:
所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
檢測方法:
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成*同步。
產品特點:
全新的熱啟動DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,可在PCR反應的過程中抑制非特異擴增,從而最大限度地減少非特異性擴增產物的產生,提高熒光定量PCR反應的特異性;
采用新型的熒光染料EvaGreen,與傳統熒光染料相比,對PCR反應抑制更小,而且熒光信號更強,檢測靈敏度更高;
含有UNG的試劑盒可以防止PCR產物污染體系,進而有效防止實驗過程中PCR產物的交叉污染;
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物、探針、模板外的所有實驗所需組分,并配備2×Buffer,可完成不同類型熒光探針的實時熒光定量PCR反應,方便用戶使用;
試劑盒的通用性強,可適用于Roche的Light Cycler、ABI各型實時熒光定量PCR儀和。