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新一代Fluidigm 微流體芯片PCR技術在農業中的應用

瀏覽次數:4965 發布日期:2011-6-17  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

通過對單核苷酸多態性(SNP)的篩查,對育種分類,鑒定,改良,及進行動植物管理, 為現代農業帶來巨大改變。但采用有關方法前, 需要對物種進行大規模的篩選研究。市場上Affymetrix公司提供的芯片可掃描500,000到900,000個SNPs位點而Illumina公司 的BeadChips可掃描300,000到2,500,000 個SNPs位點等,但此等芯片,在高通量樣本下成本將變得非常昂貴。遺傳學家需要一個高通量,高精確度但成本劃算的篩查方法 -Fluidigm公司的微流體芯片應用PCR 原理,進行于鑒別基因變異——單核苷酸多態性(SNP)篩查, 特別適合SNPs位點(約50-300)的快速的大規模樣本(樣本量達數千以上)的篩選。
我所欲也
美國阿拉斯加漁業局研究主管Jim Seeb和他的妻子Lisa 在大約20年前就采用SNPs作為遺傳標記來鑒定三文魚群體并以此管理捕撈業。在2008年1年中,阿拉斯加基因實驗室采用Applied Biosystem的384孔PCR系統對大約30,000條三文魚進行基因分型。如能對45個SNPs位點進行鑒定,但也產生1,350,000個數據點 (45x30,000), 如使用傳統384孔板及單通道PCR, 45塊384孔板只能處理384個樣本,所有樣本需要 78x45塊共3516塊板和大量試劑!但當他們發現了 Fluidigm 公司的BioMark 系統后,他們可一次檢測96個SNP點,將實驗質量大大提升,使用極小量試劑和一塊BioMark Dynamic Array可一次同時分析96個不同樣本的96個SNPs位點(9216個數據)。“這是一種更簡易和更少出錯的工作流程”Seeb說。現在,該實驗室每天在9臺Fluidigm的PCR儀上進行16塊芯片的實驗,每周4天,并計劃在2011年對200,000條三文魚進行基因分型。“沒有此項技術,我們根本無法完成這樣的任務”漁業局首席遺傳學專家Bill Templin說。
- 我所欲也,魚與牛皆可得也!
2009年的春天, 美國農業部的一位遺傳學專家Curt Van Tassell正在尋找一種方法來對世界上每一頭奶牛進行基因分型。在過去的10年中,Curt已經研究了數百頭重要的奶牛的SNPs,希望找出其對生長速度、產奶產量、奶牛健康、壽命等關系。Curt與美國Illumina公司合作在2007年研發出一種有54,000個SNPs位點的3μm微球芯片,并很快應用該技術于奶牛公牛的篩選。然而,采用該項技術,每頭公牛的鑒定成本大約需要150-200美元,須然如此昂貴,但很多的公牛也會接受分子育種檢測, 幫助農民估計公牛的價值。為了要把技術推廣到每一頭奶牛、每個小規模農場甚至是非洲等第三世界國家,該費用還需要大大降低。于是,在2009年春天,當Curt 從一家三文魚公司和種子基因分型公司那里知道Fluidigm公司基因分型平臺后,馬上接觸Fluidigm公司。然而,Curt要求的是一個足夠便宜的工具能用于類似非洲等世界上最窮的農場, 成本需要比Fluidigm公司已有平臺更低才可以!為了達到把成本下降到“現在每個數據成本的1/3到1/5”,Fluidigm 公司經過將近1年的努力,終于在2010年7月初,推出世界上第一個可重復使用的微流體芯片。使用可重復使用的芯片,每個數據點的花費大約為<0.02美元。離Fluidigm公司的目標1便士1個數據點的愿望,或許在第二代可重復使用芯片誕生時即可實現。
種子農友的成功基礎!
全球首屈一指的農用優質蔬菜種子供應商Enza Zaden公司選用Fluidigm的BioMark™系統和新款96.96動態陣列(Dynamic Array)來確保其種子供應的質量。在全球糧食供應方面,對高產和抗病作物的需求越來越大,因此,市場仍然迫切需要各類優質種子,用來種植味美又營養的蔬菜。不同的土壤特性和氣候帶會影響作物的生長,我們的地球不再是同一類種子能滿足每個人需求的地方了。面對這樣的情況,Enza Zaden公司采用基于遺傳的標記物輔助篩選技術來選種,并對幾十萬的種子進行檢查,以確保能長出恰好符合人們口味的作物產品,并對合適的品種進行育種,滿足每個人的需求。
人類與疾病?
自人類基因組計劃在2001年發布后,科學家們嘗試通過GWAS研究將SNPs與人類特征與疾病關聯起來。盡管花費了大量的經費和時間,然而很多的GWAS研究并不能很好揭示它們之間有緊密的聯系。因此,科學家急切需要一種工具去驗證某種疾病與SNPs的關聯,需要的是一種能快速驗證及重復性良好的工具。“如果你正在做大規模的驗證實驗,你需要最便宜、高質量的結果”,牛津大學維康信托基金會人類遺傳中心 (Wellcome Trust Centre for Human Genetics at the University of Oxford) 基因組首席基因組學專家Jiannis Ragoussis說。一些研究機構已經開始使用Fluidigm的芯片進行該項研究,包括美國國家癌癥研究所(NCI),他們在進行60個SNP位點、15,000個樣本的前列腺癌GWAS后續研究。“該芯片或許能夠在更廣闊的領域發揮其作用”,Ragoussis補充道。如果研究者們證明了近百個SNP位點,如50-100個,可以為醫生提供有用的信息,那么,也許有一天,將會有癌癥芯片、糖尿病芯片、心臟病芯片……
 
改編 :http://classic.the-scientist.com/article/display/57843/

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