目前內(nèi)源性RNA酶常用的RNA酶抑制劑介紹
瀏覽次數(shù):320 發(fā)布日期:2022-6-13
來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
對(duì)內(nèi)源性RNA酶,目前常用的RNA酶抑制劑有:
1、RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑(RNasin),
它是從人胎盤分離的一種蛋白質(zhì),可以與多種RNA酶緊密結(jié)合形成非共價(jià)結(jié)合的復(fù)合物,使RNA酶失活。RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑制品經(jīng)數(shù)次凍融后或放在氧化條件下應(yīng)棄之不用。RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑不干擾反轉(zhuǎn)錄或mRNA在無(wú)細(xì)胞體系中的翻譯。
2、氧釩核糖核苷復(fù)合物,
它是由氧釩離子和4種核糖核苷之中的任意一種所形成的復(fù)合物,是一種過(guò)渡態(tài)似物,它能與多種RNA酶結(jié)合并高效抑制RNA酶活性。然而氧釩核糖核苷復(fù)合物能強(qiáng)烈抑制mRNA在無(wú)細(xì)胞體系中的翻譯,因此必須用含0.1%羥基喹啉的苯酚多次抽提以除之;
3、硅藻土,
硅藻土能吸附RNA酶,并且在后續(xù)的RNA純化過(guò)程中經(jīng)離心除去;
4、異硫氰酸胍,
它是強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑,在破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)使核酸從細(xì)胞核中解離出來(lái)的同時(shí)也使RNA酶變性失活;
5、焦碳酸二乙酯(DEPC),
它是RNA酶強(qiáng)烈抑制劑,但其作用并不是絕對(duì)的。DEPC主要用于不能高壓滅菌的材料和器皿的RNA酶處理;
6、其它化學(xué)試劑,
如SDS、尿素等對(duì)RNA 酶也有一定的抑制作用。