目前內源性RNA酶常用的RNA酶抑制劑介紹
瀏覽次數:322 發布日期:2022-6-13
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對內源性RNA酶,目前常用的RNA酶抑制劑有:
1、RNA酶的蛋白質抑制劑(RNasin),
它是從人胎盤分離的一種蛋白質,可以與多種RNA酶緊密結合形成非共價結合的復合物,使RNA酶失活。RNA酶的蛋白質抑制劑制品經數次凍融后或放在氧化條件下應棄之不用。RNA酶的蛋白質抑制劑不干擾反轉錄或mRNA在無細胞體系中的翻譯。
2、氧釩核糖核苷復合物,
它是由氧釩離子和4種核糖核苷之中的任意一種所形成的復合物,是一種過渡態似物,它能與多種RNA酶結合并高效抑制RNA酶活性。然而氧釩核糖核苷復合物能強烈抑制mRNA在無細胞體系中的翻譯,因此必須用含0.1%羥基喹啉的苯酚多次抽提以除之;
3、硅藻土,
硅藻土能吸附RNA酶,并且在后續的RNA純化過程中經離心除去;
4、異硫氰酸胍,
它是強力的蛋白質變性劑,在破壞細胞結構使核酸從細胞核中解離出來的同時也使RNA酶變性失活;
5、焦碳酸二乙酯(DEPC),
它是RNA酶強烈抑制劑,但其作用并不是絕對的。DEPC主要用于不能高壓滅菌的材料和器皿的RNA酶處理;
6、其它化學試劑,
如SDS、尿素等對RNA 酶也有一定的抑制作用。