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6633
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一文攬盡:熒光定量PCR擴增曲線哪個階段最重要
2021-11-17
qPCR擴增曲線一般分成四個階段:基線期、指數期、線性期和平臺期。那么每個階段PCR產物量的變化都有什么區別呢?哪個階段最重要呢?小編這就一一道來。基線期PCR起始時,剛開始前幾個循環的熒光
2228
次
針對新手專用PCR原理講解與分析
2021-11-9
什么是實時熒光定量PCR(qPCR)?在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,最后通過Cq值和標準曲線對起始模板進行定量分析的方法。一.使DNA產物發出熒光的常用標記方
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Azure Cielo™ 實時熒光定量PCR系統在快速可靠地檢測新冠病毒的應用
2021-11-3
在應對病毒性大流行疾病時,為了有效控制病毒傳播和減少感染人群,快速且可靠的診斷是至關重要的。那么目前檢測COVID-19的 "黃金標準 "依賴于一種成熟的技術,即反轉錄定量聚合酶鏈反
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新手須知的qPCR操作技巧詳解(下篇)
2021-8-26
上一篇文章跟大家介紹了qPCR實驗中引物設計及加樣的相關操作技巧,今天我們再跟大家分享其他的實用技巧,這些入門級知識一定要掌握牢固哦。1、陰性對照的技巧:陰性對照一般是指用水代替模板的反
19393
次
MeRIP-qPCR方法原理、結果含義、展示方法及應用細談
2021-8-10
m6A等RNA修飾的主要研究手段是通過MeRIP方法對發生修飾的片段進行富集,其后進行高通量測序分析修飾位點。而無論是一篇僅展示修飾位點分布特點的譜學文章,還是深入研究修飾調控基因表達機制的文
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PCR Efficiency在線分析工具在預測PCR擴增效率的使用
2021-7-30
目前已開發多種工具可以進行PCR引物的設計,但大多數工具只考慮避免發夾結構形成、3'末端核苷酸的選擇、引物解鏈溫度等問題,并沒有考慮內在擴增子的特征以及沒有預測給定擴增子和引物對的P
4831
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新手須知的qPCR操作技巧(上篇)
2021-7-30
實時熒光定量 PCR(qPCR)自問世以來,就受到了廣大生命科學實驗工作者和醫院檢驗工作者的極大關注,使得該技術得到了很快的普及。雖然qPCR技術目前應用方向十分廣泛,但是仍碰到很多用戶在實驗
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次
熒光定量PCR實驗流程中常見的陰性對照與陽性對照介紹
2021-7-15
什么鬼?實驗結果又不理想,Ct值怎么又這么大呢?是哪一步出現了問題呢?哎哎哎,怎么沒有擴增曲線呢?在您看到熒光定量 PCR 實驗結果時,是不是也發出過這樣的疑問呢?總感覺哪個實驗步驟出現了
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次
qPCR性能分析的四大要素-效率、線性動態范圍、檢測限和精密度
2021-6-28
MIQE指南中明確提出,進行qPCR實驗時必須測定以下檢測性能特點:PCR的效率、線性動態范圍、LOD和精密度。1、PCR的效率:強大和精確的qPCR測定通常具有高效率。在報告目的基因相對于參照基因的mR
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次
實時熒光定量PCR引物設計原則中擴增子大小對qPCR產量影響的應用
2021-6-11
一般情況下,實時熒光定量PCR引物設計原則中會提到擴增子大小對實時熒光定量PCR的擴增效率有一定作用。所以通常建議使用相對較短的擴增子長度,范圍為50到150個堿基對(bp)。由于小片段不太容易
3620
次
MIQE中核酸質量控制環節的操作簡易說明
2021-6-3
RNA樣本:比較不同的樣本時,應保證各樣本中含有大致相同量的RNA,因此需要對所提取的RNA進行定量。常用的定量方法包括:分光光度法、熒光染料檢測、瓊脂糖凝膠電泳、毛細管凝膠電泳和3':5
4126
次
超敏一步巢式Taqman qPCR熒光核酸檢測技術的機理及應用優勢
2021-3-23
巢式PCR具有很高的靈敏度和特異性,但傳統的巢式PCR采用兩對引物,通過兩輪PCR,進行目標產物的擴增。這種操作的不便性,使得其高靈敏度的特性難以應用到快速檢測和臨床診斷中。在單管巢式PCR的
1964
次
無需ROX校準的Azure Cielo™ Real-Time PCR光學系統的應用
2021-1-29
ROX是一種廣泛使用的惰性熒光染料,通常添加到qPCR反應液中以校正熒光信號。然而,隨著熒光技術在儀器中的發展,比如在Azure Cielo™實時熒光定量PCR系統,為了標準化而單獨使用染料的步驟
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次
ac4C榮登Nature-RNA修飾研究大有可為
2020-10-20
RNA修飾是表觀遺傳學中調控轉錄后基因表達的關鍵過程,目前對m6A RNA修飾的研究已進行的如火如荼,但除了m6A以外仍有多種RNA修飾類型參與調控轉錄后的基因表達,其中包括m1A、m5C、m7G、2&rsquo
1596
次
去甲基化酶ALKBH5在胰腺癌中的應用
2020-7-9
文章導讀表觀遺傳修飾如m6A甲基化在腫 瘤的發生和發展中起到重要作用。而甲基化酶對ai癥的影響也受到廣 泛關注。其中去甲基化酶ALKBH5已被報道過能通過維持乳腺ai細胞的干細胞性而促進腫 瘤的形
1823
次
PCR疑難問題粉碎機:逆轉錄PCR的操作要點與方法
2020-6-30
【前情回顧】PCR疑難問題粉碎機(一)——終點PCR 【前情回顧】PCR疑難問題粉碎機(二)——熒光定量PCR 逆轉錄 PCR(Reverse TranscriptionPCR, RT-PCR)是一種以 RN
2605
次
PCR疑難問題解答第二篇:熒光定量PCR
2020-6-16
【前情回顧】PCR疑難問題粉碎機(一)——終點PCR 實時熒光定量PCR(quantitative PCR, qPCR)通過對PCR擴增反應中的每一個循環產物熒光信號的實時監測從而實現對起始模板的定性
927 次
30分鐘的精確定量-染料法熒光定量PCR
2020-5-14
【前情回顧】 【1】PCR試劑選擇困難癥?其實可以很簡單!點擊了解 【2】高分辨率熔解曲線(HRM)分析預混Mix(PCR),用于基因篩查?點擊了解 【3】飛行時間質譜(MALDI-TOF)法SNP分析(P
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RT-qPCR常用的SYBR@Green I雙鏈DNA結合染料的應用
2020-5-13
隨著新冠病毒肆虐全球,聊病毒是個敏感話題。今天我們就從這個敏感話題著手,好好聊一聊。 病毒是一種個體微小,結構簡單,只含一種核酸(DNA或RNA)。我們現在提起來就咬牙切齒的的新冠病毒
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如何提高PCR的擴增特異性
2020-5-11
疫情當下,最熱頻的詞匯莫過于核酸檢測了。而核酸檢測最核心的技術也越來越被大眾所熟知,就是我們高中就學過的聚合酶鏈式反應,又稱為PCR。 自從1983年,Kary Mullis才發明出這個用于擴增
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